農(nóng)桿菌介導(dǎo)的DEP1基因轉(zhuǎn)化水稻的研究.pdf

1、直立穗是繼矮化和理想株型以后水稻株型適應(yīng)超高產(chǎn)要求的又一重要形態(tài)進(jìn)化。研究表明,直立穗型品種穗長(zhǎng)較短而葉片直立,葉夾角小即直立穗群體結(jié)構(gòu)更趨合理,有利于改善群體受光姿態(tài),促進(jìn)CO2擴(kuò)散,調(diào)節(jié)群體株間溫度、降低濕度等生態(tài)條件,從而提高冠層光合速率,增加物質(zhì)生產(chǎn)量,緩和了穗數(shù)和穗粒數(shù)的矛盾,產(chǎn)量潛力明顯提高,同時(shí)增加冠層基部光量,增強(qiáng)根系活力,提高抗倒性。本研究利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將控制水稻穗型的主效基因.DEP1導(dǎo)入優(yōu)質(zhì)秈稻9R406,并研究其

2、遺傳和表達(dá),以選育出優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的水稻品系(種)。
　　 本研究的主要結(jié)果如下:
　　 1.建立秈稻保持系9R406的根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的高效遺傳轉(zhuǎn)化體系。以水稻成熟胚誘導(dǎo)的胚性愈傷為轉(zhuǎn)化受體材料,預(yù)培養(yǎng)4天,農(nóng)桿菌(OD=1.0)侵染30min,共培養(yǎng)3天后潮霉素篩選2次(2周為1次),挑選抗性愈傷進(jìn)行預(yù)分化、分化、生根并移栽再生苗。
　　 2.通過上述轉(zhuǎn)化體系將DEP1基因?qū)攵i稻9R406中,共獲得220個(gè)轉(zhuǎn)基因克

3、隆,共轉(zhuǎn)化頻率為8.76％；經(jīng)分化得到209個(gè)轉(zhuǎn)基因植株,分化率為95％。
　　 3.Southern雜交和RT-PCR檢測(cè)結(jié)果表明:外源基因以低拷貝(1-2)整合方式插入轉(zhuǎn)基因植株的基因組中,并轉(zhuǎn)錄了完整的mRNA。
　　 4.利用PCR擴(kuò)增結(jié)果對(duì)T1代轉(zhuǎn)基因植株的外源基因的分離進(jìn)行了遺傳分析,結(jié)果表明:標(biāo)記基因在T1代中分離比符合孟德爾遺傳規(guī)律,且與目的基因緊密連鎖。
　　 5.T1代轉(zhuǎn)基因株系農(nóng)藝性狀分析結(jié)