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認證類型：個人認證

認證主體：常**（實名認證）

IP屬地：河北

IP屬地：河北 更新時間：2024-03-13 格式：pdf 頁數(shù)：58 大?。?0.25MB 人氣指數(shù)：12 舉報 版權(quán)申訴

1、分類號：$ 5 1 2 ．1密 級： 公Ⅱ單位代碼： 1 0 0 8 6學(xué) 號： 2 0 0 9 2 8 4利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的幼穗法將水稻O s D R E B 2 ．2 基因?qū)胄←湹难芯縎 t u d i e s o n R i c eo S D R E B 2 。2G e n e T r a n s f o r m a t i o n o fW h e a t v i a t h e A g r o b a c t e r i u

2、m —m e d i a t e d F l o r a lD i p M e t h o d學(xué)位申請人：指導(dǎo)教師：學(xué)科專業(yè)：學(xué)位類別：授予單位：答辯日期：王維楊學(xué)舉 教 授郎明林 副研究員作物遺傳育種農(nóng)學(xué)碩士河北農(nóng)業(yè)大學(xué)二。一二年 月 日摘要鹽堿、干旱、低溫等非生物逆境脅迫嚴(yán)重影響植物的生長發(fā)育，是造成農(nóng)作物減產(chǎn)的直接原因。逆境響應(yīng)轉(zhuǎn)錄因子的表達能夠產(chǎn)生與順式元件及其它相關(guān)蛋白之問的相互作用，可激活或抑制下游一系列抗逆功能基因的轉(zhuǎn)錄，

3、從而提高植物的綜合抗逆性，在抗逆轉(zhuǎn)基因育種中具有重要功能價值。植物中A P 2 家族的D R E B 類轉(zhuǎn)錄因子基因是近年來抗逆分子育種研究的熱點，該類基因?qū)μ岣咧参锏木C合抗逆性具有重要科學(xué)意義和應(yīng)用價值。小麥?zhǔn)鞘澜缟现匾募Z食作物，目I i l f , J , 麥新品種的培育依然主要靠常規(guī)育種。雖然近幾年己逐步取得了一些可喜進展，但相對于玉米、水稻等其他禾本科作物，其轉(zhuǎn)基因研究進展仍然比較緩慢。利用現(xiàn)代基因工程技術(shù)進行小麥的品種改良是

4、當(dāng)前小麥育種的一個新方向。它可以打破生殖隔離，使得不同物種問遺傳交流成為可能，為拓寬植物可利用基因庫創(chuàng)造條件，彌補了常規(guī)雜交育種的不足，加速了作物遺傳育種的發(fā)展。本研究以實驗室和大田中處于丌花期的小麥品種‘周麥1 6 ’和‘冀麥3 8 ’幼穗為材料，嘗試了以農(nóng)桿菌介導(dǎo)的幼穗侵染法向小麥轉(zhuǎn)化水稻A P 2 家族O s D R E B 2 ．2 基因的研究。所用載體為C a M V 3 5 S 啟動子驅(qū)動的無報告基因的的植物表達載體P B

5、l l 2 1 ．O s D R E B 2 ．2 ，所用農(nóng)桿菌為E H A l 0 5 和G V 3 1 0 1 ?；蚪MD N A P C R 技術(shù)驗證了在T 1 代獲得了轉(zhuǎn)基因植株，經(jīng)過對T 1 代1 0 6 株共1 0 5 9 個籽粒結(jié)果統(tǒng)計表明，農(nóng)桿菌介導(dǎo)的幼穗法平均轉(zhuǎn)化率達到了3 4 ．8 ％，其中，不同的農(nóng)桿菌菌株對不同的小麥品種表現(xiàn)出不同的轉(zhuǎn)化效率。在此基礎(chǔ)上提取了T 2 代植株8 個家系2 8 個植株的總R N A ，

6、經(jīng)R T ．P C R 進行轉(zhuǎn)錄水平的檢測，結(jié)果在2 8 個株系均檢測到了伙D R E B 2 ．2基因的表達，其中有2 3 個株系為高的轉(zhuǎn)錄水平表達。這表明轉(zhuǎn)化的O s D R E B 2 ．2 基因已經(jīng)成功遺傳到第T 2 代，并在轉(zhuǎn)錄水平上實現(xiàn)了穩(wěn)定的表達。通過2 0 ％P E G 和2 5 0 m MN a C l 處理，驗證了小麥植株過表達水稻O s D R E B 2 ．2 基因顯著提高了幼苗的抗旱能力，部分植系顯示了高的抗鹽