利用農桿菌介導法將HLF和SB401雙基因導入水稻的研究.pdf

1、水稻(Oryxa sativa L．)是世界上最重要的糧食作物之一，我國一半以上人口以稻米為主食?，F在育種技術的發(fā)展，可以使水稻在特定區(qū)域和/或栽培條件下畝產達到1000公斤以上，保證水稻的高產穩(wěn)產，人們不再拘泥于溫飽，而對稻米營養(yǎng)品質的要求越來越高，所以更多的育種家們希望培育出顆粒飽滿，色澤潔白，米質油潤、味道香甜，營養(yǎng)豐富，富含蛋白質、必需氨基酸、必需脂肪酸等成分的優(yōu)良品種。因此蛋白質和必需氨基酸的含量成為人們首先關注的兩大營養(yǎng)特性

2、。 利用傳統(tǒng)育種手段或通過將含有相應外源基因的轉基因植株進行有性雜交皆可改良蛋白質品質等農藝性狀，但兩種方法的缺點都是育種周期長，見效慢。而將控制不同農藝性狀的多個基因構建在同一載體的同一T-DNA上，導入目標水稻中，是同時改良水稻多個目標性狀的一條有效途徑。本研究利用農桿菌介導法，將構建在同一載體T-DNA上的人乳鐵蛋白基因(hLF)和富含賴氨酸的馬鈴薯花粉特異水溶性蛋白基因(sb401)導入兩個水稻品種中，取得了以下結果：

3、 1．通過對比觀察外植體的誘導情況和愈傷狀態(tài)，發(fā)現：中花15和粳抗5號的幼胚誘導率最高，并且愈傷狀態(tài)最好；中花15的愈傷誘導率高于粳抗5號，但從愈傷狀態(tài)上看，粳抗5號更適合用作懸浮培養(yǎng)。 2．粳抗5號在50天之內就可以建立良好的懸浮細胞系，對其懸浮細胞不同時期的生長特性測定和分化表現觀察，確定了懸浮細胞每次繼代的最佳時間為7-10天，懸浮細胞培養(yǎng)中期的再生能力最好。 3．以潮霉素作為篩選劑分別對中花15和粳抗5號愈