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文檔簡介
1、該研究以櫻桃番茄(江蘇省農(nóng)科院TM-Cherry-94-引-1)為試材,建立了體外繁殖無性系.比較了不同激素、不同激素濃度配比、蔗糖濃度和一些常用附加物(谷氨酰胺,脯氨酸、酵母浸出物、色氨酸、硝酸銀)對番茄子葉、下胚軸愈傷組織形成和不定芽分化的影響.并對影響外植體轉(zhuǎn)化的因素(感染時間、共培養(yǎng)時間、農(nóng)桿菌濃度、篩選方式等)進行了探討.構(gòu)建了雙元表達載體dCaMV35Setr1-Ghipt-pBBBast,etr1處于雙CaMV35S啟動子
2、控制之下,表達增強;IPT基因處于生長素誘導型啟動子 GH控制之下.利用農(nóng)桿菌EHA105(d35CaMVSetr1-GHipt-pBBBast)介導轉(zhuǎn)化,獲得了番茄轉(zhuǎn)乙烯受體突變體(etr1)和異戊烯基轉(zhuǎn)移酶(IPT)雙基因的再生植株,轉(zhuǎn)化植株在除草劑草丁瞵(PPT)3mg/L的培養(yǎng)基中生長良好.PCR檢測證明目的基因已經(jīng)整合到試材櫻桃番茄基因組中,RT-PCR檢測證明目的基因在轉(zhuǎn)錄水平有一定表達.PAT酶活性檢測發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因品種的酶活
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