盾葉薯蕷(dioscoreazingiberensisc.h.wright)再生體系的建立和農桿菌介導的rfcarrm1基因片段轉化研究

1、浙江師范大學碩士學位論文盾葉薯蕷（Dioscorea zingiberensis C.H.Wright）再生體系的建立和農桿菌介導的rFCA-RRM1基因片段轉化研究姓名：任椒矯申請學位級別：碩士專業(yè)：生態(tài)學（植物生態(tài)學）指導教師：馬伯軍200811092 ．盾葉薯蕷營養(yǎng)器官薯蕷皂甙元含量的H P L C 測定采用K r o m a s i lC ．1 8 柱，甲醇：水= 9 5 ：5 流動相，流速1 1 0 m l ／m i n ，U

2、 V 檢測器，檢測波長2 0 8 n m ，分別對盾葉薯蕷一年生再生植株的根狀莖、須根和地上纏繞莖進行薯蕷皂甙元含量測定。薯蕷皂甙元在0 ．2 4 2 2 5 “ - ' 2 ．2 4 2 2 5 9 9 范圍內峰面積與其濃度線性關系良好( R 2 = 0 ．9 8 3 3 ) ，精密度R S D 為0 ．2 1 ％( n 叫) 。H P L C 測定結果顯示，一年生根狀莖的薯蕷皂甙元含量為1 ．8 2 - 4 - 0 ．0 9

3、 ％，其地上部分和須根中不含薯蕷皂甙元。3 ．盾葉薯蕷遺傳轉化體系的初探研究了菌液濃度、侵染時間、共培養(yǎng)時間、篩選方式、抗性篩選H y g B 濃度和C e f 抑菌濃度6 個因子對盾葉薯蕷遺傳轉化的影響，結果表明：菌液O D 6 0 0值為0 ．5 ，侵染3 0 m i n ，共培養(yǎng)3 d ，用5 0 0 m g ·L - 1 的C e f 抑菌，以4 0 m g ·L ．1 的H y g B 延遲7 d 篩選，轉