干擾熱休克蛋白60加重LPS等對離體大鼠胰腺組織的損傷.pdf

1、目的：研究大鼠胰腺組織在熱休克蛋白60(HSP60)被干擾后，對脂多糖(LPS)、急性胰腺炎血清(APs)、急性胰腺炎腹水(APa)等損傷因子刺激的反應(yīng)，以探討HSP60對胰腺組織的可能的保護作用。
　　 方法：分離培養(yǎng)大鼠離體胰腺組織塊，用LPS、APs、APa刺激離體胰腺組織塊，以NS作為對照，在作用前和作用后1、2、4h時間點測定以下指標：采用碘-淀粉比色法測定上清液中淀粉酶水平；采用ELISA法測定上清液中腫瘤壞死因子(

2、TNF-a)水平；采用MTT法檢測胰腺組織的活力；采用Realtime-PCR測定胰腺組織HSP60的表達量。然后用RNA干擾技術(shù)抑制離體胰腺組織中HSP60的表達后，再用LPS、APs、APa刺激胰腺組織，同樣在1、2、4h時間點測定上述指標的變化。
　　 結(jié)果：LPS、APs、APa刺激離體胰腺組織后1h，胰腺組織的活力與對照組比較稍有降低，上清液中淀粉酶水平、上清液中TNF-a水平、離體胰腺組織HSP60的表達量比對照組有

3、所增高，但差異均無統(tǒng)計學意義；在刺激后2h、4h，離體胰腺組織的活力、胰腺組織HSP60的表達量明顯降低(P<0.05)，培養(yǎng)上清液中淀粉酶和TNF-a水平與對照組比較明顯增高(P<0.05)。RNA干擾離體胰腺組織的HSP60后，用LPS、APs、APa刺激胰腺組織，與對照組及HSP60未干擾組比較，刺激后1h胰腺組織HSP60的表達量降低(P<0.05)，胰腺組織的活力降低(P<0.05)，上清液中淀粉酶和TNF-a水平均明顯增高(