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文檔簡(jiǎn)介
1、背景:血清陰性脊柱關(guān)節(jié)?。⊿eronegative Spondyloarthropathy, SpA)是一組具有共同特征的相互關(guān)聯(lián)的侵犯脊柱、外周關(guān)節(jié)和關(guān)節(jié)周圍組織的多系統(tǒng)炎性疾病的總稱。其病因不明,一般認(rèn)為與遺傳和環(huán)境因素有關(guān)。其中細(xì)菌感染在SpA的發(fā)生及復(fù)發(fā)中起著重要的作用。Toll樣受體(Toll-like receptors, TLRs)作為一種模式識(shí)別受體,在抗感染免疫中首先被人們認(rèn)識(shí),TLRs激活后引發(fā)細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)最終導(dǎo)致
2、炎性介質(zhì)的釋放,啟動(dòng)炎癥和適應(yīng)性免疫應(yīng)答。目前的研究認(rèn)為T(mén)LRs信號(hào)通路參與慢性免疫性炎性關(guān)節(jié)炎的發(fā)生、發(fā)展,對(duì)TLRs的深入研究將有助于SpA發(fā)病機(jī)制的了解,并為治療提供新的思路。
目的:檢測(cè)TLR2和TLR4在SpA患者外周血CD14+單核細(xì)胞表面的表達(dá)變化;探討TLR2和TLR4表達(dá)水平與SpA患者病情活動(dòng)性的關(guān)系;檢測(cè)SpA患者血清高遷移率族蛋白-1(high mobility group box chromodoma
3、l protein1, HMGB1)、血清白介素-6(Interleukin-6,IL-6)、腫瘤壞死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)與健康對(duì)照的差異;分析SpA患者血清HMGB1濃度與TLR2、TLR4表達(dá)水平及炎癥指標(biāo)的關(guān)系。
方法:根據(jù)有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)選擇SpA患者71例及健康人30例作為研究對(duì)象。應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)分別檢測(cè)CD14+單核細(xì)胞表面TLR2和TLR4陽(yáng)性細(xì)胞的表達(dá)水平并進(jìn)行比較。應(yīng)
4、用雙抗體夾心固相酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定血清HMGB1、IL-6、TNF-α的濃度水平,收集患者臨床資料并計(jì)算SpA患者bath疾病活動(dòng)指數(shù)(Bath Ankylosing Spondylitis Disease Activity Index, BASDAI)評(píng)分。根據(jù)BASDAI評(píng)分將SpA患者組分為活動(dòng)組54例(BASDAI評(píng)分>4)和非活動(dòng)組17例(BASDAI評(píng)分≤4),分別比較正常對(duì)照組、活動(dòng)組和非活動(dòng)組三組間TLR2
5、、TLR4表達(dá)水平的差異以及血清HMGB1、IL-6、TNF-α濃度水平的不同。最后將TLR2、TLR4表達(dá)水平分別與IL-6、TNF-α、HMGB1的濃度水平及血沉(ESR)、C反應(yīng)蛋白(CRP)、免疫球蛋白(Ig)和BASDAI評(píng)分等臨床資料進(jìn)行相關(guān)性分析。
結(jié)果:
1. SpA患者外周血CD14+單核細(xì)胞中TLR2+細(xì)胞所占比例為86.7±14.6(%)與正常對(duì)照組82.82±8.60(%)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P
6、=0.729);TLR2+細(xì)胞的平均熒光強(qiáng)度(mean fluorescence intensity, MFI)為143.4±91.7與正常對(duì)照組116.8±86.1,統(tǒng)計(jì)學(xué)尚無(wú)差異(P=0.870)。TLR4+細(xì)胞所占比例為39.4±10.1(%),高于正常對(duì)照組22.3±7.5(%)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001);TLR4+細(xì)胞的MFI為33.2±15.9,正常對(duì)照組28.3±11.6差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.245)。
7、 2.將患者組依BASDAI分為活動(dòng)組與非活動(dòng)組,其中TLR2+細(xì)胞的比例在活動(dòng)、非活動(dòng)及正常對(duì)照組的各組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。TLR2+細(xì)胞的MFI在各組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。TLR4+細(xì)胞的比例在非活動(dòng)組和活動(dòng)組(32.9±11.4,42.5±16.1)與正常組相比(22.3±8.0)有顯著性差異(P<0.001),活動(dòng)組和非活動(dòng)組之間相比有顯著性差異(P<0.001)。TLR4+細(xì)胞的MFI在各組
8、間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。
3. SpA患者血清HMGB1、IL-6、TNF-α濃度水平在SpA患者非活動(dòng)組和活動(dòng)組分別為[11.9±5.5(ng/ml),5.74±2.4(pg/ml),36.5±10.3(pg/ml);15.7±6.8(ng/ml),8.36±4.1(pg/ml),64.2±16.1(pg/ml)]與正常組相比[7.2±4.8(ng/ml);10.8±8.0(pg/ml);2.87±1.1(pg
9、/ml)]均有顯著性差異(P<0.001),活動(dòng)組和非活動(dòng)組之間相比亦均有顯著性差異(P<0.001)。
4.患者血清HMGB1濃度水平與患者血清IL-6濃度水平成正相關(guān)(r=0.511, P=0.000);患者血清HMGB1濃度水平與患者血清TNF-α濃度水平成正相關(guān)(r=0.481, P=0.000)。
5. TLR2表達(dá)與臨床資料及細(xì)胞因子的相關(guān)性:TLR2+細(xì)胞的比例與患者ESR呈正相關(guān)(r=0.296,P=
10、0.017)與血清IgG定量呈正相關(guān)(r=0.357,P=0.011)。TLR2+細(xì)胞的MFI與患者ESR呈正相關(guān)(r=0.361,P=0.04);與血清IgA定量呈正相關(guān)(r=0.327,P=0.023);與血清IgG定量呈正相關(guān)(r=0.285,P=0.049)。
6. TLR4表達(dá)與臨床資料及細(xì)胞因子的相關(guān)性:TLR4+細(xì)胞的比例與血清HMGB1濃度水平成正相關(guān)(r=0.284,P=0.020);與患者血清IL-6濃度水
11、平成正相關(guān)(r=0.451, P=0.000);與患者血清TNF-α濃度水平成正相關(guān),(r=0.342,P=0.004);TLR4+細(xì)胞的比例與患者ESR呈正相關(guān)(r=0.299,P=0.016);與血清IgA定量呈正相關(guān)(r=0.355,P=0.011);與BASDAI呈正相關(guān)(r=0.325,P=0.007)。
結(jié)論:
1. SpA患者外周血單核細(xì)胞表面TLR4表達(dá)升高,與正常對(duì)照組相比有顯著性差異。提示TLR4
12、與SpA發(fā)病有關(guān)。
2. TLR4表達(dá)水平與ESR和IgA呈正相關(guān),TLR4表達(dá)水平與BASDAI呈正相關(guān)。TLR2表達(dá)水平與ESR和IgG呈正相關(guān);提示SpA患者外周血單核細(xì)胞TLR2、TLR4表達(dá)水平可作為判斷SpA患者疾病活動(dòng)度的參考指標(biāo)。
3. SpA患者血清HMGB1明顯升高且與IL-6、TNF-α呈正相關(guān),提示HMGB1與SpA疾病活動(dòng)有關(guān)。
4. SpA患者血清HMGB1濃度水平與TLR4正相
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