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文檔簡介
1、目的 觀察類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血單核細(xì)胞Toll樣受體2(toll-1ike receptor 2,TLR2)的表達(dá)狀況,及其與疾病活動程度和臨床指標(biāo)之間的關(guān)系,探討RA的發(fā)病機(jī)制。 方法 活動期RA患者27例、穩(wěn)定期RA患者20例及年齡性別匹配的正常對照18例,分別抽取外周靜脈血10ml,F(xiàn)icoll密度梯度離心法分離外周血單個核細(xì)胞(pefipheral blood mono
2、nuclear cell,PBMC),用FITC-CDl4單克隆抗體和PE-TLR2單克隆抗體雙標(biāo)記外周血PBMC,采用流式細(xì)胞術(shù)檢測外周血單核細(xì)胞(即CDl4+細(xì)胞)表面TLR2的平均熒光強度及TLR2<'+>CDl4<'+>細(xì)胞占CDl4<'+>細(xì)胞的百分比;將新鮮分離的PBMC在37℃、體積分?jǐn)?shù)為5%的CO<,2>培養(yǎng)箱中孵育60分鐘后,收集貼壁的單核細(xì)胞,抽取單核細(xì)胞總RNA,采用RT-PCR方法檢測細(xì)胞內(nèi)TLR2mRNA的表達(dá)
3、。并將單核細(xì)胞TLR2的表達(dá)與疾病活動評分(Disease Active Score,DAS)、血清C反應(yīng)蛋白(serum C-reactive protein,CRP)、紅細(xì)胞沉降率(erythrocytesedimentation rate,ESR) 、類風(fēng)濕因子(rheumatoid factor,RF)、抗環(huán)瓜氨酸肽(the cyclic citrullinated peptide,CCP)抗體等臨床指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)分析。
4、 結(jié)果 活動期RA患者外周血單核細(xì)胞TLR2的平均熒光強度(mean fluorescence intensity,MFI)顯著高于緩解期RA患者及正常對照(P<0.05),而緩解期RA患者TLR2與正常對照相比,差異無統(tǒng)計學(xué)意義?;顒悠赗A患者TLR2<'+>CDl4<'+>/CDl4<'+>的比值顯著高于緩解期RA患者及正常對照(P<0.05),而緩解期RA患者TLR2與正常對照相比,差異無統(tǒng)計學(xué)意義?;顒悠赗A外周血單核細(xì)胞TLR
5、2mRNA水平顯著高于緩解期RA患者及正常對照(P<0.05),而緩解期RA患者TLR2與正常對照相比,差異無統(tǒng)計學(xué)意義。RA患者外周血TLR2的表達(dá)與DAS(P=0.001,r=0.615)、CRP(P=0.035,r=0.408)及ESR(P=0.039,r=0.399)相關(guān),而與RF(P=0.066,r=0.395)及抗CCP抗體(P=0.081,r=0.247)無明顯相關(guān)性。結(jié)論 活動期RA患者外周血單核細(xì)胞TLR2的表達(dá)增高
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