類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者外周血單核細(xì)胞HMGB1的分泌機(jī)制及沙利度胺對其的影響.pdf

1、目的：探討類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis，RA)患者外周血單核細(xì)胞(peripheral blood monocytes)中高遷移率族蛋白-1(high mobility group box chromosomal protein 1，HMGB1)的釋放和細(xì)胞內(nèi)定位及沙利度胺(Thalidomide，商品名：反應(yīng)停)對其的影響。 方法：RA患者19例及年齡性別匹配的正常對照20例，分別抽取外周靜脈血5ml

2、，F(xiàn)icoll密度梯度離心法分離外周血單核細(xì)胞，分別用100ng/mlTNF-α或100ng/mlTNF-α加40 μg/ml沙利度胺處理細(xì)胞后，放入在37℃、體積分?jǐn)?shù)為5﹪的CO<,2>培養(yǎng)箱中孵育24小時，收集細(xì)胞培養(yǎng)液的上清，Western Blot檢測HMGB1的表達(dá)；另采用細(xì)胞免疫熒光法觀察培養(yǎng)的外周血單核細(xì)胞中HMGB1的胞內(nèi)定位。 結(jié)果： RA組外周血單核細(xì)胞培養(yǎng)液的上清中HMGB1的蛋白水平比健康對照組顯著增高(

3、P<0.05)；100ng/ml TNF-α加40 μ g/ml沙利度胺處理的RA患者外周血單核細(xì)胞培養(yǎng)液的上清中HMGBl的表達(dá)較100ng/ml TNF-α刺激的細(xì)胞明顯下降(P<0.05)，100ng/mlTNF-α刺激RA患者的外周血單核細(xì)胞24小時后培養(yǎng)液的上清中HMGBl的表達(dá)與未加任何刺激因子組比較沒有顯著差異。RA患者外周血單核細(xì)胞中HMGB1主要表達(dá)于胞核，100ng/mlTNF-α刺激外周血單核細(xì)胞24小時后HMGB