FK520的分離及其衍生物的合成.pdf

1、免疫抑制劑是一類具有免疫抑制作用的藥物，又稱為抗排斥藥物。目前在臨床上主要用于治療自身免疫性疾病和防止臟器移植排斥。國(guó)外對(duì)免疫抑制劑的研究自1954年人類第一例同卵雙生子間腎臟移植手術(shù)取得成功后，醫(yī)學(xué)家在器官移植方面的研究取得了許多重大進(jìn)展。自20世紀(jì)80年代初環(huán)孢素A(CsA)應(yīng)用于臨床，器官移植取得巨大成就以來，F(xiàn)K506、MMF又先后獲得美國(guó)FDA認(rèn)證并上市。免疫抑制劑在器官移植方面起著越來越重要的作用；免疫抑制劑除了被用來防止器

2、官排斥，也可用來治療嚴(yán)重的皮膚病如牛皮癬，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，克羅恩氏病(慢性炎癥的消化道)和片狀脫發(fā)(斑禿)等其他疾病，其中一些疾病屬于“自身免疫”性疾病。隨著對(duì)移植免疫學(xué)、分子生物學(xué)技術(shù)和理論的認(rèn)識(shí)與掌握，人們相繼發(fā)現(xiàn)并研制出許多新藥，其中一些現(xiàn)已進(jìn)入臨床試驗(yàn)及評(píng)估階段。近年來，國(guó)內(nèi)學(xué)者也正積極致力于免疫抑制劑的研究與開發(fā)。但是由于起步較晚，研發(fā)成本較高，目前只有少數(shù)幾家國(guó)內(nèi)公司涉足，而且主要以仿制國(guó)外新藥為主。 吡美莫司(pim

3、ecrolimus)[商品名]Elidel，為新一代免疫抑制類藥物。由瑞士諾華公司開發(fā)，于2002年在英國(guó)率先上市，主要用做免疫抑制藥物和特應(yīng)性皮炎的治療藥物，其作為抗牛皮癬藥物和治療哮喘藥物己進(jìn)入臨床二期試驗(yàn)階段，作為抗關(guān)節(jié)炎藥物和治療胃腸道炎癥藥物即將進(jìn)入臨床試驗(yàn)。吡美莫司是大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物子囊霉素(ascomycin，F(xiàn)K520)的一種衍生物，國(guó)內(nèi)目前尚未有廠家生產(chǎn)，因此，研究該藥物的合成方法對(duì)新藥開發(fā)具有一定的應(yīng)用價(jià)值。目的

4、 1.建立從FK506尾液中分離純化FK506與FK520的方法，得到FK506和FK520的純品。 2.以FK520為原料，建立吡美莫司的制備方法，優(yōu)化合成工藝。 3.初步建立吡美莫司的含量測(cè)定方法并對(duì)其異構(gòu)體現(xiàn)象進(jìn)行初步研究。 方法： 1.建立了FK506與FK520的分離方法，首先對(duì)兩者的混合溶液進(jìn)行粗提，除去混合液中的油狀物質(zhì)和其他雜質(zhì)；然后采用硝酸銀硅膠柱層析法分離得到二者的純品。2以FK

5、520為原料，合成目標(biāo)產(chǎn)物吡美莫司。 2.1 ①以FK520為原料，采用叔丁基二甲基硅烷基三氟甲烷磺酸酯(TBDMS Trifluoromethanesulfonate)對(duì)FK520的C-24和C-33位羥基進(jìn)行保護(hù)，生成Ⅰ；②Ⅰ在對(duì)甲基苯磺酸條件下脫去C-33位保護(hù)基，生成Ⅱ；③Ⅱ在DMAP催化條件下，經(jīng)鄰硝基苯磺酰氯活化生成Ⅲ；④以氯化鋰做氯化試劑，將Ⅲ氯化，生成Ⅳ；⑤Ⅳ在HF酸中水解脫去C-24位保護(hù)基，得到目標(biāo)產(chǎn)物Ⅴ。其

6、中Ⅱ可以不經(jīng)過活化而直接氯化生成Ⅳ。 2.2 我們參閱最新文獻(xiàn)，發(fā)現(xiàn)FK520 C-24位羥基活性較低，可以不必進(jìn)行特殊保護(hù)直接氯化，我們分別采用了三苯基膦與BTC氯化試劑、三苯基膦與NCS氯化試劑和三苯基膦與四氯化碳氯化試劑，取得了理想的結(jié)果，并對(duì)工藝進(jìn)行改進(jìn)，減少了操作步驟，降低了成本，減少了污染。 3 初步建立了吡美莫司的含量測(cè)定方法，并初步考察了吡美莫司的異構(gòu)現(xiàn)象。 結(jié)果： 1.成功分離得到了FK506和

7、FK520的純品，純度均大于98％。 2.得到了FK520的衍生物吡美莫司，經(jīng)核磁共振氫譜、核磁共振碳譜、質(zhì)譜分析符合其結(jié)構(gòu)特征。對(duì)專利文獻(xiàn)方法進(jìn)行了改進(jìn)，提高了收率，降低了成本；吡美莫司的總收率42.1％，純度＞96％，熔點(diǎn)為135.2-136.1℃，與文獻(xiàn)報(bào)道相符。 3.初步確立了吡美莫司的含量測(cè)定方法，初步考察了吡美莫司的異構(gòu)現(xiàn)象。 結(jié)論： 1.成功分離了FK506和FK520的混合物，所采用的硝酸