骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定向分化肝細(xì)胞并肝內(nèi)移植及軟肝煎應(yīng)用對(duì)肝纖維化形成大鼠肝功能影響的研究.pdf

1、 為了探索骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞橫向分化為肝細(xì)胞的作用機(jī)制，研究骨髓源性的肝細(xì)胞肝內(nèi)移植定向分化，筆者向肝纖維化形成大鼠肝臟內(nèi)移植經(jīng)誘導(dǎo)的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞來源的肝細(xì)胞，觀察其分布、分化情況，并觀察聯(lián)合應(yīng)用中藥軟肝煎對(duì)肝纖維化形成大鼠肝臟功能改善的效果。　　首先從SD大鼠的股骨中提取骨髓干細(xì)胞，利用Percoll分離液密度梯度離心法結(jié)合貼壁法實(shí)現(xiàn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的體外分離純化、培養(yǎng)、傳代擴(kuò)增。取第3代的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢

2、測細(xì)胞表面抗原CD44、CD34、CD45、CD31、CD90，對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行鑒定?！　⊙芯恳越?jīng)BrdU(以5ug/ml加入BrdU孵育24小時(shí))標(biāo)記骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞及誘導(dǎo)后的肝細(xì)胞行肝纖維化形成的SD大鼠肝內(nèi)移植。通過計(jì)算機(jī)圖像分析儀觀查在肝臟標(biāo)記細(xì)胞的分布以及白蛋白的表達(dá)。結(jié)果表明體內(nèi)誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞及體外誘導(dǎo)后的肝細(xì)胞均能定向移植到肝纖維化形成的SD大鼠肝臟組織中。 試驗(yàn)結(jié)果為，建立了一種短期內(nèi)快速有效的富集