血管源性因子表達異常與IgA腎病腎間質(zhì)纖維化的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：IgA腎病(IgA nephropathy)是我國原發(fā)性腎小球腎炎最常見的類型，在確診后5年～25年內(nèi)約20％～40％的患者逐漸發(fā)展為終末期腎病(ESRD)。IgAN的預后不僅與腎小球硬化、腎功能損傷、高血壓、尿蛋白排泄量有關(guān)，還與腎間質(zhì)纖維化關(guān)系密切。腎小管管周毛細血管網(wǎng)(peritubular capillaries，PTCs)丟失直接影響到腎間質(zhì)供血供氧及營養(yǎng)物質(zhì)的供應，進而引起或加重腎間質(zhì)纖維化。血小板反應蛋白(throm

2、bospondin-1，TSP-1)是一種細胞外基質(zhì)糖蛋白，可以通過與CD36結(jié)合、抑制細胞生存基因Bcl-2表達、增加調(diào)亡基因Bax表達、激活P59fyn/caspase-3/P38MAPK等途徑誘導內(nèi)皮細胞凋亡、抑制新生血管形成。血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelialgrowth factor，VEGF)是內(nèi)皮細胞的高度特異性有絲分裂原。本文通過觀察IgA腎病腎組織TSP-1蛋白及TSP-1mRNA、VEGF表達

3、及PTCs的改變，探討血管源性因子表達失衡在IgA腎病PTCs變化及腎間質(zhì)纖維化中的作用。 方法： 選擇2005.12-2006.7在河北醫(yī)大二院腎內(nèi)科住院、經(jīng)臨床與腎活檢診斷為原發(fā)性IgA腎病患者54例(其中男性28例，女性26例，年齡13-60歲，32.31±12.65歲)，除外狼瘡性腎炎、過敏性紫癜性腎炎、乙肝相關(guān)性腎炎、肝硬化、腫瘤等繼發(fā)性IgA腎病，活檢前均未用過糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑、低分子肝素鈉等治療。詳細

4、收集患者臨床(包括血壓、血脂、血漿白蛋白、血清IgA、24小時尿蛋白定量、尿滲透壓、血肌酐等)和病理資料。腎小管間質(zhì)病變程度用Katafuchi法分為Ⅰ(9例)、Ⅱ(17例)、Ⅲ(15例)、Ⅳ(13例)4級病變組；10例腎小球輕微病變患者做對照組。應用原位雜交法檢測TSP-1 mRNA的表達；免疫組化PV法檢測TSP-1、VEGF、Ⅲ型膠原、CD34蛋白的表達。在200倍視野下計數(shù)腎間質(zhì)中CD34陽性的完整毛細血管腔個數(shù)，取平均值作為該

5、切片的腎小管周圍毛細血管指數(shù)(PCI)。在北航IMS-2000圖像分析系統(tǒng)下進行圖像分析。 結(jié)果 ①腎間質(zhì)PTCs隨病變程度加重而減少以CD34標記毛細血管內(nèi)皮細胞，觀察管周毛細血管情況，其在對照組、Ⅰ、Ⅱ級病變組血管擴張較好，管腔光滑均勻。PCI在照組、Ⅰ及Ⅱ級病變組三組的組間差異無統(tǒng)計學意義(27.0±1.88～22.9±3.89，P=0.328～0.311)；而至Ⅲ、Ⅳ級病變組腎間質(zhì)管周毛細血管管腔逐漸萎縮，PCI

6、比Ⅰ、Ⅱ級病變組明顯減少(22.9±3.89～14.56±2.28，P均＜0.05)。 ②腎組織中TsP-1蛋白及TsP-1 mRNA的表達變化TSP-1蛋白及TSP-1 mRNA在對照組及I級病變組腎組織中無或僅有極少量表達。隨著腎組織病變及纖維化程度加重，表達量漸增加(I～IV級病變各組間差異有統(tǒng)計學意義，TSP-1蛋白從13.11±1.50％增至33.97±9.18％，P＜0.01；TSP-1mRNA從17.64±1.21

7、％增至37.03±9.63％，P＜0.05)。主要表達在部分腎小管上皮細胞胞漿，腎小球無表達。 ③VEGF及Ⅲ型膠原表達及腎小球硬化率VEGF在腎小球可見少量表達，主要在腎小管上皮細胞胞漿表達。對照組與Ⅰ級病變組織表達差異無統(tǒng)計學意義(P=0.396)。與Ⅰ級病變組相比，Ⅱ級、Ⅲ級病變組VEGF表達增加(從21.48±7.54％增至40.20±5.47％，P均＜0.05)；至Ⅳ級病變時則表達減少，與Ⅲ級病變組織有統(tǒng)計學差異(從4

8、0.20±5.47％減至19.53±5.45％，P＜0.01)。Ⅲ型膠原主要在腎小球及間質(zhì)的纖維結(jié)締組織表達，隨著IgA腎病病變程度的加重，其在腎間質(zhì)表達面積進行性增加，Ⅰ級、Ⅱ級、Ⅲ級、Ⅳ級病變組表達各組間差異有統(tǒng)計學意義(從16.63±4.72％增至36.85±4.63％，P＜0.01)。腎小球硬化率隨病變加重逐漸增加(從0.43±1.00％增至48.52±32.61％)，各組間差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。其與間質(zhì)纖維化程度平

9、行，與Ⅲ型膠原成正相關(guān)(r=0.546，P＜0.01)。 ④TSP-1、TSP-1 mRNA與各觀察指標的相關(guān)性分析TSP-1蛋白及TSP-1 mRNA均與Ⅲ型膠原正相關(guān)(r=0.671、0.655，P均＜0.05)，兩者與PCI負相關(guān)(r=-0.644、-0.564，P均＜0.05)。TSP-1蛋白及TSP-1 mRNA與VEGF相關(guān)性無統(tǒng)計學意義(r=-0.324、-0.375，P=0.28～0.14)。TSP-1蛋白及TS