內(nèi)抑素組織表達(dá)趨勢與腎間質(zhì)微血管損傷的相關(guān)性研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:探討在幼年大鼠腎間質(zhì)微血管損傷過程中內(nèi)抑素(endostatin, ENS)、血管內(nèi)皮生長因子(vascular endotheliAlgrowth factor, VEGF)、CD31組織定位表達(dá)的趨勢、相關(guān)性及其潛在的病理意義,以及用阿托伐他汀干預(yù)的效應(yīng)。
   方法:(1)采用單側(cè)輸尿管結(jié)扎的方法制備實驗性梗阻性腎小管間質(zhì)損傷模型(UUO模型);3-4周齡幼年雄性SD大鼠72只,分為正常對照組(24只)、模型組(24

2、只)、模型干預(yù)組(24只),于實驗第1、3、7、14天每組各取6只大鼠,取病變腎臟石蠟包埋并切片;(2)HE 染色觀察腎小管萎縮擴張、間質(zhì)微血管損傷情況;(3)Masson 染色評價腎間質(zhì)纖維化程度;(4)免疫組化方法檢測大鼠腎組織ENS、VEGF及CD31的表達(dá),并從時間和組織定位表達(dá)趨勢上評價ENS、VEGF及CD31的相關(guān)性,探討ENS在腎間質(zhì)微血管損傷中的作用;(5)用SPSS16.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學(xué)處理。
   結(jié)果

3、:(1)常規(guī)HE及Masson 染色:正常對照組腎臟結(jié)構(gòu)無明顯病理改變;模型組術(shù)后術(shù)后3天即可見遠(yuǎn)端腎小管擴張,管周毛細(xì)血管減少,腎間質(zhì)輕度水腫,術(shù)后7天近端腎小管擴張明顯,間質(zhì)中大量炎細(xì)胞浸潤,部分小管上皮細(xì)胞變性壞死;第14天可見彌漫的腎小管基底膜增厚皺縮,膠原增多,纖維化明顯,膠原纖維染色綠染面積增多,且不同時間點差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P 均<0.01)。模型干預(yù)組各時間點腎間質(zhì)病變程度較模型組輕,但較對照組重(P 均<0.01)

4、。(2)免疫組化染色測定腎間質(zhì)ENS、VEGF及CD31蛋白表達(dá)情況:?對照組:ENS蛋白弱表達(dá)于腎小球上皮細(xì)胞和腎小管周圍毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞胞漿,腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)幾乎無表達(dá),各時間點差異無顯著性(P 均>0.05)。VEGF蛋白廣泛表達(dá)于腎小球上皮細(xì)胞、腎小管上皮細(xì)胞及足突細(xì)胞,呈黃色顆粒狀分布于細(xì)胞胞漿中,各時間點差異無顯著性(P 均>0.05);CD31蛋白廣泛表達(dá)于腎小球內(nèi)皮細(xì)胞和腎小管周圍毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞中,呈黃色顆粒狀分布于細(xì)

5、胞胞漿中,各時間點差異無顯著性(P 均>0.05);②模型組:ENS蛋白術(shù)后1天在腎小管上皮細(xì)胞部位的表達(dá)漸增加,陽性信號強于對照組,且在間質(zhì)中出現(xiàn)片狀表達(dá),隨著實驗時間的延續(xù),病變的加重,上述表達(dá)趨勢明顯加強,7d時表達(dá)最強,后隨病變的發(fā)展表達(dá)反而較前下降;VEGF 術(shù)后7天,足突細(xì)胞未見陽性表達(dá),部分腎小管上皮細(xì)胞胞漿中有弱陽性表達(dá)表達(dá)陽性程度弱于正常對照組;隨著腎間質(zhì)病理損傷程度加重,VEGF表達(dá)的陽性面積均呈顯著遞減,術(shù)后第14

6、天,表達(dá)明顯減弱;CD31術(shù)后第1天在腎小球內(nèi)皮細(xì)胞和腎小管周毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞有表達(dá),術(shù)后3天,CD31表達(dá)開始減弱隨著腎間質(zhì)病理損傷程度加重,腎小管周圍毛細(xì)血管密度明顯遞減,術(shù)后14天表達(dá)減弱明顯。三種蛋白表達(dá)各時間點組內(nèi)比較差異有顯著性(P 均<0.01),各時間點與對照組比差異有顯著性(P 均<0.01);③模型干預(yù)組:ENS蛋白表達(dá)各時間點明顯低于模型組,但高于對照組,差別有均有統(tǒng)計學(xué)意義(P 均<0.01);CD31蛋白表達(dá)各

7、時間點明顯高于模型組,但低于對照組,差別有均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P 均<0.01)。(3)相關(guān)性分析:模型組ENS與VEGF及CD31之間相關(guān)系數(shù)r值均小于零,呈負(fù)相關(guān)關(guān)系,VEGF與CD31之間相關(guān)系數(shù)r值大于零,呈正相關(guān)關(guān)系(P 均<0.01)。
   結(jié)論:本研究提示UUO 幼鼠腎間質(zhì)纖維化早期腎間質(zhì)內(nèi)ENS表達(dá)上調(diào),VEGF與CD31表達(dá)下調(diào),ENS與CD31及VEGF表達(dá)呈負(fù)相關(guān),VEGF與CD31表達(dá)呈正相關(guān)。表明在幼年

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