殼聚糖、瓊膠糖的提取及其對(duì)藻膽蛋白緩釋作用的研究.pdf

1、近年來(lái)，癌癥已成為威脅人類健康的第一大殺手，傳統(tǒng)療法象放療、化療和手術(shù)療法均會(huì)給病人帶來(lái)極大的痛苦。光動(dòng)力療法(Photodyllamic therapy，PDT)治療腫瘤是近年發(fā)展起來(lái)的一種新方法，毒副作用小，療效確切。其基本原理是利用一些熒光量子產(chǎn)額高的光敏劑注射體內(nèi)，腫瘤細(xì)胞與其親和性高于正常細(xì)胞，因而潴留在腫瘤細(xì)胞中。當(dāng)用強(qiáng)光照射后，光敏劑吸收光子躍遷至激發(fā)態(tài)，處于激發(fā)態(tài)的光敏劑再將能量傳至周圍的氧分子，產(chǎn)生單線態(tài)氧，殺傷腫瘤細(xì)

2、胞，而對(duì)正常組織損傷極小。 PDT療法的核心是找到合適的光敏劑，藻膽蛋白是一類水溶性色蛋白，由脫輔基蛋白和開(kāi)鏈四吡咯結(jié)構(gòu)的色基通過(guò)硫醚鍵共價(jià)交聯(lián)而成，具有極高的熒光量子產(chǎn)額。能夠在適宜波長(zhǎng)光的激發(fā)下，產(chǎn)生單線態(tài)氧和其他的氧自由基，近年來(lái)的研究表明藻膽蛋白極有可能成為新一代高效低毒的光敏劑。但由于藻膽蛋白的蛋白特性，使得它易于被酶所降解，因此藻膽蛋白要想實(shí)現(xiàn)藥物化，必須尋找一種合適的劑型。 藥物控制釋放技術(shù)為藻膽蛋白藥物化

3、提供了有效途徑。殼聚糖和瓊膠糖都是天然易降解高分子多糖，它們?cè)卺t(yī)藥方面都有應(yīng)用，而殼聚糖更是在藥物緩釋方面有著良好的口碑。本論文從對(duì)蝦殼中提取了甲殼素，并探討甲殼素脫乙酰化過(guò)程中堿處理方式及溫度對(duì)脫乙酰度和分子量的影響。結(jié)果表明：加入乙醇、升高溫度能夠提高甲殼素的脫乙酰度；乙醇存在下的脫乙酰反應(yīng)是一級(jí)反應(yīng)；采用間歇堿處理的方式能夠在提高脫乙酰度的同時(shí)，保持較高的分子量。 采用多種方法從江蘺龍須菜中提取了瓊膠，并研究了堿處理、微波

4、處理、超聲波輔助處理等方法對(duì)龍須菜的瓊膠提取率、硫酸基含量和多糖含量的影響。研究結(jié)果表明：當(dāng)堿質(zhì)量分?jǐn)?shù)由2.5％增加到10％時(shí)，瓊膠產(chǎn)率由15％降低到9.8％，硫酸基含量由2.66％降低到2.06％，同時(shí)，多糖含量由98.3％增加到102.6％；微波和超聲波輔助處理在不同程度上增加了瓊膠的提取率和多糖含量，同時(shí)降低了硫酸基含量。另外，本文還從宏觀和微觀兩個(gè)角度考察了堿處理前后龍須菜藻體的變化。對(duì)龍須菜瓊膠，經(jīng)DE-22和Sephadex

5、 G-200柱層析純化，得到一種含微量硫酸基的瓊膠糖，此多糖經(jīng)Q-Sepharose柱層析鑒定為單一組分。紫外光譜顯示它不含蛋白質(zhì)、多肽及核酸，紅外光譜揭示它含3,6-內(nèi)醚半乳糖特征吸收以及微量的硫酸基，熱學(xué)性質(zhì)表明在其0～700℃升溫過(guò)程中存在兩個(gè)失重過(guò)程，旋光分析表明隨溫度的升高，該多糖水溶液存在一個(gè)由有序構(gòu)象(螺旋結(jié)構(gòu))向無(wú)序構(gòu)象(無(wú)規(guī)線團(tuán))轉(zhuǎn)變的過(guò)程。本論文還通過(guò)硫酸銨沉淀法和柱層析法從多管藻和螺旋藻中分離提取了光譜純和電泳純的

6、藻膽蛋白，可以用于藻膽蛋白藥物緩釋的研究。 本論文還采用兩種親水性高分子材料．殼聚糖、瓊膠糖通過(guò)懸浮聚合的方法制備出凝膠球、磁力球與孔球，所得微球被用作藻紅和藻藍(lán)蛋白的吸附材料，發(fā)現(xiàn)其對(duì)藻紅蛋白的最大吸附量出現(xiàn)藻紅蛋白的等電點(diǎn)附近，當(dāng)藻紅蛋白濃度低于1.25 mg/ml時(shí)，吸附量隨藻紅蛋白濃度的增加而增加。并且，吸附量還隨溫度升高而增大，受離子強(qiáng)度的影響較小。微球中加入瓊膠糖可在一定程度上降低吸附量。改變?cè)寮t蛋白的負(fù)載量和在微球