一氧化氮和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變中作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的: 觀察NO在ROP模型動(dòng)物的視網(wǎng)膜組織的水平，探討分別應(yīng)用選擇性NOS抑制劑L-NNA及L-NIL對(duì)ROP模型動(dòng)物視網(wǎng)膜的新生血管和視網(wǎng)膜組織VEGF蛋白表達(dá)的影響。
　　 方法:
　　 1)建立高濃度氧誘導(dǎo)的Spraque-Dawley(SD)新生鼠ROP模型，隨機(jī)分成空氣組、單純氧氣組、高氧期L-NNA治療組、高氧期L-NNA對(duì)照組、相對(duì)低氧期L-NNA 治療組、相對(duì)低氧期L-NNA對(duì)照組、高氧期L-NIL治療

2、組及高氧期L-NIL對(duì)照組。
　　 2)測(cè)定吸光度，檢測(cè)空氣組與單純氧氣組分別在高氧期、相對(duì)低氧期時(shí)新生鼠視網(wǎng)膜cNOS和iNOS活力，反映視網(wǎng)膜NO水平。
　　 3)藥物治療：高氧期L-NNA治療組、相對(duì)低氧期L-NNA治療組在對(duì)應(yīng)的高氧期、相對(duì)低氧期，腹腔注射cNOS抑制劑L-NNA的生理鹽水液(150mg/kg·d 即50ml/kg·d)，高氧期L-NNA對(duì)照組、相對(duì)低氧期L-NNA對(duì)照組在相應(yīng)時(shí)期腹腔注射生理鹽水

3、液(50ml/kg·d)；高氧期L-NIL治療組和高氧期L-NIL對(duì)照組分別在高氧期腹腔注射iNOS抑制劑L-NIL (25mg/kg·d即10ml/kg·d)及生理鹽水液(10ml/kg·d)。
　　 4)相對(duì)低氧期結(jié)束時(shí)，取各組新生鼠眼球制備HE染色切片，計(jì)數(shù)視網(wǎng)膜新生血管內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)；取治療組與對(duì)照組新生鼠完整視網(wǎng)膜，采用Western Blot法檢測(cè)VEGF蛋白的表達(dá)。
　　 結(jié)果:
　　 1)單純氧氣組新

4、生鼠視網(wǎng)膜cNOS活力(高氧期0.1953±0.0244U/mgprot，相對(duì)低氧期0.1472±0.0149U/mgprot)較空氣組(高氧期0.1237±0.0380U/mgprot，相對(duì)低氧期0.0959±0.0268U/mgprot)顯著增高(P＜0.05)，iNOS活力明顯降低(空氣組高氧期0.2192±0.0882U/mgprot，單純氧氣組高氧期0.1077±0.0430U/mgrot)(P＜0.05)。
　　 2

5、)L-NNA治療組與對(duì)照組比較，視網(wǎng)膜新生血管內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)(高氧期L-NNA 治療組89.19±11.86個(gè)/片，高氧期L-NNA對(duì)照組135.18±22.99個(gè)/片，相對(duì)低氧期L-NNA治療組79.62±10.87個(gè)/片，相對(duì)低氧期L-NNA對(duì)照組135.15±23.36個(gè)/片)顯著減少(P＜0.05)、視網(wǎng)膜VEGF表達(dá)在高氧期增加60.38%在相對(duì)低氧期減少17.97%，以上指標(biāo)在L-NIL治療組與對(duì)照組均無明顯變化(P＞0.05)