細胞因子對人早孕滋養(yǎng)層細胞與卵巢癌細胞系HO-8910侵襲性影響的比較研究.pdf

1、第一軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文細胞因子對人早孕滋養(yǎng)層細胞與卵巢癌細胞系HO8910侵襲性影響的比較研究姓名：陳慧申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師：邢福祺陳士嶺20040501細胞因子對人早孕滋養(yǎng)層細胞與卵巢癌細胞系HO8910侵襲性影響的比較研究中文摘要目的在體外培養(yǎng)原代人早孕滋養(yǎng)層細胞及卵巢癌細胞系HO一8910細胞的基礎(chǔ)上，觀察4種外源性細胞因子對人早孕滋養(yǎng)層細胞及HO一8910細胞的效應(yīng)，比較細胞因子對兩種細胞在基因表達水平、蛋

2、白表達水平以及細胞水平侵襲能力的影響。方法早孕絨毛組織取自(6～8周)自愿人工流產(chǎn)的健康早孕婦女，由南方醫(yī)院婦產(chǎn)科提供。采用絨毛組織貼塊培養(yǎng)法進行原代早孕滋養(yǎng)層細胞的培養(yǎng)，并鑒定和純化原代早孕滋養(yǎng)層細胞。培養(yǎng)卵巢癌細胞系HO8910細胞。分別以EGF、TNF一Ⅱ、IL1d、IL10刺激培養(yǎng)細胞48小時，用RTPCR檢測各侵襲相關(guān)基因MMP一2、MMP9、MTAl、KAllmRNA的表達，細胞ELISA法檢測蛋白MMP一2和CD44v6的

3、表達，利用Matrigel膜侵入培養(yǎng)系統(tǒng)，采用染色和顯微鏡下細胞計數(shù)的方法，對穿透Matrigel膜的細胞進行定量分析，記錄各項檢測指標的數(shù)據(jù)，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，比較兩種細胞在體外侵襲性的異同。結(jié)果：1體外觀察到人早孕滋養(yǎng)層細胞表達MTAl和KAllmRNA，以及CD44v6。2EGF促進兩種細胞MMP2、MMP一9mRNA的表達，并呈濃度依賴性；TNF—d顯著提高兩種細胞MMP一2mRNA的表達，僅對細胞系HO8910細胞的MMP9mRN