紫花牡荊素對(duì)體外培養(yǎng)卵巢癌HO-8910細(xì)胞增殖和凋亡的影響.pdf

1、目的:探討紫花牡荊素(5,3′-dihydroxy-3,6,7,4′-tetram thoxyflavone;casticin;CAS)抑制體外培養(yǎng)人卵巢癌HO-8910細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)凋亡的效應(yīng)及其可能的部分分子生物學(xué)機(jī)制。
　　方法:
　　1. MTT法檢測(cè)CAS對(duì)體外培養(yǎng)人卵巢癌HO-8910細(xì)胞增殖的抑制作用;
　　2. Hoechst33258染色檢測(cè)CAS對(duì)體外培養(yǎng)人卵巢癌HO-8910細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)改變;

2、
　　3.流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)CAS對(duì)體外培養(yǎng)人卵巢癌HO-8910細(xì)胞凋亡率的影響;
　　4. Western blot分析CAS對(duì)體外培養(yǎng)人卵巢癌HO-8910細(xì)胞蛋白表達(dá)變化的影響。
　　結(jié)果:
　　1. MTT法顯示:CAS對(duì)人卵巢癌HO-8910細(xì)胞增殖有較強(qiáng)的抑制作用,不同濃度的CAS(2,4,8μg/mL)在不同的時(shí)間段(24 h、48 h、72 h)對(duì)HO-8910細(xì)胞具有明顯生長(zhǎng)抑制效應(yīng),呈

3、劑量和時(shí)間依賴性(P<0.05),其中CAS作用48 h,抑制率分別8.4％±1.8%、28.6%±2.1%、35.1%±3.1%,IC50值6.46μg/mL。
　　2. Hoechst33258染色顯示:CAS(2,4,8μg/mL)作用HO-8910細(xì)胞48 h,細(xì)胞出現(xiàn)核固縮、核碎裂、核染色質(zhì)邊集、凋亡小體形成等典型的細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)特征,凋亡細(xì)胞的數(shù)呈劑量依賴性增多;
　　3.流式細(xì)胞術(shù)(FCM)顯示:CAS對(duì)人卵巢

4、癌HO-8910細(xì)胞有明顯的誘導(dǎo)凋亡的效應(yīng)CAS(2,4,8μg/mL)作用HO-8910細(xì)胞48 h,細(xì)胞凋亡率分別為20.3%、33.4%、52.8%(P<0.05);
　　4. Western blot顯示:CAS(2,4,8μg/mL)作用人卵巢癌HO-8910細(xì)胞48 h, cyclin B1蛋白表達(dá)降低( P<0.05),平均相對(duì)灰度值分別為1.000±0.010,0.580±0.060,0.590±0.03,0.20

5、0±0.045;p21蛋白表達(dá)增高,與空白對(duì)照組相比較,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P<0.05),平均相對(duì)灰度值分別為1.000±0.120,3.950±0.150,4.790±0.420,8.220±0.580;caspase-3蛋白表達(dá)與空白對(duì)照組相比較,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P<0.05),平均相對(duì)灰度值分別為1.000±0.065,1.450±0.071,2.770±0.270,2.650±0.150。
　　結(jié)論:
　　1. CAS