順鉑對(duì)卵巢癌細(xì)胞系Ho-8910中BMi-1、P16INK4A的表達(dá)影響.pdf

1、目的:
　　研究順鉑對(duì)卵巢癌細(xì)胞HO-8910中BMI-1、P16INK4A的表達(dá)影響，初步分析這兩種基因與順鉑誘導(dǎo)的卵巢癌細(xì)胞凋亡的關(guān)系。
　　方法:
　　1.培養(yǎng)對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期人卵巢癌細(xì)胞株HO-8910，加入不同濃度梯度的順鉑，分別干預(yù)24h、48h、72h后采用MTT法檢測(cè)細(xì)胞的抑制率。
　　2.培養(yǎng)對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期人卵巢癌細(xì)胞株HO-8910，加入不同濃度的順鉑，干預(yù)48h后采用TUNEL染色法檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況。

2、
　　3.培養(yǎng)對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期人卵巢癌細(xì)胞株HO-8910，加入一定濃度的順鉑，干預(yù)48h后采用Western blotting技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞中BMI-1、P16INK4A蛋白的相對(duì)表達(dá)量。
　　4.培養(yǎng)對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期人卵巢癌細(xì)胞株HO-8910，加入一定濃度的順鉑，干預(yù)48h后采用Real-time PCR技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞中BMI-1mRNA、P16INK4A mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
　　結(jié)果:
　　1.在順鉑濃度為0.312

3、5ug/ml～10ug/ml的范圍內(nèi)能夠抑制卵巢癌細(xì)胞HO-8910增殖，其抑制作用隨著藥物濃度的增加及時(shí)間的延長(zhǎng)而增強(qiáng)(P＜0.05)。
　　2.TUNEL試驗(yàn)證實(shí)順鉑能夠誘導(dǎo)卵巢癌細(xì)胞HO-8910凋亡，凋亡陽性信號(hào)隨藥物濃度的增加而增強(qiáng)，提示凋亡細(xì)胞數(shù)目隨順鉑濃度的增加而增加。
　　3.順鉑處理卵巢癌細(xì)胞HO-8910細(xì)胞48h后，BMI-1蛋白相對(duì)表達(dá)量及P16INK4A蛋白相對(duì)表達(dá)量均降低，與對(duì)照組相比P＜0.05

4、，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　4.順鉑干預(yù)卵巢癌細(xì)胞HO-8910細(xì)胞48h后，BMI-1 mRNA相對(duì)表達(dá)量及P16INK4A mRNA相對(duì)表達(dá)量均降低，與對(duì)照組相比P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論:
　　1、在一定濃度范圍內(nèi)，順鉑能夠抑制卵巢癌細(xì)胞HO-8910增殖并能誘導(dǎo)其凋亡，其抑制作用具有濃度和時(shí)間依賴性。
　　2、BMI-1、P16 INK4A在順鉑誘導(dǎo)的卵巢癌細(xì)胞HO-8910凋亡中表達(dá)下調(diào)，