皺紋盤鮑與刺參微衛(wèi)星DNA位點(diǎn)的分離篩選.pdf

1、本文簡介了微衛(wèi)星DNA的發(fā)展歷程，微衛(wèi)星位點(diǎn)的分離和分析方法及其在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用，并對微衛(wèi)星作為遺傳標(biāo)記的優(yōu)缺點(diǎn)進(jìn)行了探討，同時(shí)，運(yùn)用經(jīng)典分子生物學(xué)方法和磁珠富集法分別進(jìn)行了皺紋盤鮑、刺參微衛(wèi)星DNA的分離篩選。1皺紋盤鮑微衛(wèi)星DNA的篩選　　運(yùn)用經(jīng)典分子生物學(xué)方法，即構(gòu)建基因組文庫，通過放射性[γ-32P]標(biāo)記的探針進(jìn)行雜交篩選，共得到102個皺紋盤鮑微衛(wèi)星DNA序列，其中完美型60個(占58.8％)，非完美型29個(占28.4％

2、)，復(fù)合型13個(占12.7％)；重復(fù)次數(shù)在3-10次的比例最高，為48個，重復(fù)次數(shù)最多的達(dá)到104次；重復(fù)核苷酸中以雙核苷酸和四核苷酸較多，分別為82個(占80.4％)和14個(占13.7％)，其中雙核苷酸又以(AC/TG)n最常見，占81.4％。根據(jù)得到的皺紋盤鮑微衛(wèi)星DNA保守序列，用PrimerPrimer5軟件設(shè)計(jì)出81對引物。2刺參微衛(wèi)星DNA的篩選　　磁珠富集法是一種快速、高效的分離微衛(wèi)星分子標(biāo)記的方法。本研究通過磁珠富