豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）活疫苗研制.pdf

1、本研究使用華中農業(yè)大學病毒室分離、鑒定的豬繁殖與呼吸綜合征病毒PRRSVHA株進行PRRSV活疫苗的研制。Marc-145是近年來應用較多的細胞，對豬繁殖與呼吸綜合征病毒敏感性高，病毒能達到較高的滴度，均在10-4.5/0.1ml以上。并對其細胞系進行了顯微鏡檢查、細菌和霉菌檢驗、支原體檢驗、病毒檢驗、細胞鑒別、胞核學檢查、致瘤和致癌性檢驗檢驗，檢測結果為：Marc-145細胞為致密的多邊形狀；不含厭氧菌和兼性需氧菌、無霉菌污染、不含有

2、支原體、不含外源病毒及病毒強毒；尚無致瘤和致癌性。 對疫苗成品的安全性檢驗，中試的6批疫苗每批都采用了4頭10-15日齡初生乳豬，4頭斷奶仔豬和2頭妊娠60-70天的母豬分別進行單劑量、單劑量重復、加倍劑量注射，觀察結果均未出現任何不良反應，甚至10倍大劑量免疫也無異常，健活；懷孕母豬未出現不良反應，無流產，死胎等情況出現，均正常分娩，胎兒發(fā)育正常。疫苗免疫后，在排泄物和分泌物中未能分離到病毒，不散毒，不存在污染環(huán)境和任何潛在危

3、險。因此證實該疫苗是安全的。 本疫苗的免疫效力試驗，4批中試產品分別將疫苗按瓶簽注明肌肉注射PRRSV抗體陰性仔豬4頭，1頭份/頭，同條件相同的對照組，免疫后28天進行PRRSV強毒攻擊(4ml/頭)。觀察發(fā)病(出現呼吸困難、體溫升高等癥狀，判為發(fā)病)情況，免疫豬均保護4/4。通過乳豬、仔豬和妊娠母豬分別進行免疫效力試驗，免疫后2周可檢測到PRRSV病毒中和抗體，到第4周抗體水平最高達到1：16，至第8周未見明顯地下降。