18315.榛屬植物功能型內(nèi)生真菌的篩選

1、捅凄iii嗣i蕾IIIII鼉fi嗣摘要本研究以榛屬植物為研究對(duì)象，目的是分離鑒定具有生物活性內(nèi)生真菌，對(duì)其粗提物的活性分析并初步純化、優(yōu)化發(fā)酵培養(yǎng)基以提高其生物活性。從榛子樹(shù)皮中分離獲得到8株內(nèi)生真菌，經(jīng)形態(tài)學(xué)鑒定，初步鑒定為2株青霉屬(Penicillium)、l株鏈孢霉]蘺(Fusarium)、l株脈孢菌屬(Neurospora)、l株赤霉屬(Gibberella)、I株枝孢屬(Cladosporium)、l株肉座菌屬(Hypocr

2、ea)、1株P(guān)araphaeosphaeria屬。就分離得到的內(nèi)生真菌發(fā)酵培養(yǎng)，對(duì)其產(chǎn)物進(jìn)行活性篩選，以DPPH清除率、FRAP值為指標(biāo)，綜合總抗氧化能力測(cè)定結(jié)果，篩選到1株抗氧化活性菌株JTLR1，經(jīng)鑒定為Penicilliumsp。綜合6種抗氧化能力測(cè)定方法對(duì)JTLR一1菌株抗氧化活性進(jìn)行分析，分別研究了JTLR1菌株發(fā)酵液提取物清除DPPH、羥自由基、氧自由基能力、總抗氧化能力和還原能力，以及抑制亞油酸過(guò)氧化能力，并以Vc、BHT

3、為對(duì)照。結(jié)果表明，JTLR1菌株發(fā)酵液提取物對(duì)DPPH、羥自由基、氧自由基具有一定的清除作用，同時(shí)表現(xiàn)出一定的總抗氧化能力和還原能力以及抑制亞油酸過(guò)氧化能力。JTLR1菌株發(fā)酵液提取物抗氧化能力與濃度體現(xiàn)出一定的量效關(guān)系，隨著濃度的升高，抗氧化活性增強(qiáng)。與對(duì)照品BHT、Ve相比，清除羥自由基能力、還原力、總抗氧化能力、清除氧自由基能力、均高于BHT低于Vc；抑制亞油酸體系過(guò)氧化能力均高于BHT和Ve，DPPH清除率與BHT、Ve相近。J

4、TLR1菌株發(fā)酵液提取物中總酚含量為1852002％，總黃酮含量為196001％。相關(guān)性研究表明，JTLR1菌株發(fā)酵液提取物抗氧化能力與總酚總黃酮有著顯著的相關(guān)性。不同抗氧化方法之間也有較好的相關(guān)性。JTLR1菌株發(fā)酵提取物經(jīng)硅膠柱層析可將有效活性物質(zhì)與雜質(zhì)粗分離，獲得了兩組較高抗氧化活性的餾分，分別是餾分5(乙酸乙酯：乙醇=5：2)，餾分6(乙酸乙酯：乙醇=5：1)。清除DPPH自由基試驗(yàn)表明，IC50分別為105a：01lmg／mL

5、、099a：009mg／mL，純化后餾分6的清除率可達(dá)8440a：256％。本研究探討了營(yíng)養(yǎng)成分對(duì)抗氧化物質(zhì)產(chǎn)生的影響，以獲得抗氧化成分最佳的『IIIIPIIIIllJllIIIIIIIIIIIrIrlUIrIJIIlY2122375黑龍江大學(xué)碩士學(xué)位論文發(fā)酵條件，綜合運(yùn)用單因子試驗(yàn)，PB試驗(yàn)設(shè)計(jì)及RMS法得出，適合JTLR1菌株產(chǎn)生抗氧化活性成分的培養(yǎng)基組成為：葡萄糖309／L，蛋白胨39／L，硝酸銅0318mg／L，硫酸鋅0631m