菜蛾盤絨繭蜂寄生對小菜蛾幼蟲神經(jīng)肽轉(zhuǎn)錄水平的影響.pdf

1、本論文首先在分析實驗室已有的小菜蛾幼蟲腦轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)基礎(chǔ)上，應(yīng)用表達(dá)序列標(biāo)簽(expressed sequence tag，EST)序列驗證的方法鑒定出分屬于17個神經(jīng)肽家族的19個小菜蛾神經(jīng)肽基因，通過cDNA末端快速克?。╮apid-amplification of cDNA ends，RACE）方法獲得了其中13個基因的全長;其次應(yīng)用熒光定量PCR(qRT-PCR)的方法檢測了這些神經(jīng)肽基因在小菜蛾幼蟲不同發(fā)育階段的轉(zhuǎn)錄規(guī)律以及菜蛾

2、盤絨繭蜂寄生/假寄生對這些神經(jīng)肽基因轉(zhuǎn)錄的影響?，F(xiàn)將結(jié)果總結(jié)如下:
　　1)小菜蛾幼蟲腦神經(jīng)肽家族基因的鑒定
　　對小菜蛾幼蟲腦轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)進(jìn)行Blastx分析，篩選出能匹配到昆蟲神經(jīng)肽基因的21個EST序列并逐一克隆驗證，然后用RACE法獲得包括Adipokinetic hormoneⅠ、Adipokinetic hormoneⅡ、Allatostatin A、Allatostatin C、CCHamide、Bursicon

3、α、Bursiconβ、Crustacean cardioactivepeptide、 Ion transport peptide、 Neuroparsin、Neuropeptide F、Prothoracicotropic hormone和Allatotropin在內(nèi)的13個神經(jīng)肽基因的cDNA全長，獲得Short neuropeptide F、Diuretic hormone、FMRFamid、Tachykinin、Neuropep

4、tide-likepeptide和Leucokinin在內(nèi)的6個基因的3'端序列。
　　2)小菜蛾幼蟲神經(jīng)肽基因在小菜蛾幼蟲不同發(fā)育階段的轉(zhuǎn)錄規(guī)律
　　通過qRT-PCR的方法對小菜蛾19個神經(jīng)肽基因在小菜蛾幼蟲不同發(fā)育階段的轉(zhuǎn)錄模式進(jìn)行了檢測。結(jié)果表明，小菜蛾19個神經(jīng)肽基因在不同發(fā)育歷期的總體轉(zhuǎn)錄規(guī)律是:在每個齡期的末期存在一個轉(zhuǎn)錄高峰。
　　3)菜蛾盤絨繭蜂寄生/假寄生對小菜蛾幼蟲神經(jīng)肽基因轉(zhuǎn)錄的影響
　　

5、通過qRT-PCR的方法對菜蛾盤絨繭蜂寄生/假寄生后的小菜蛾幼蟲神經(jīng)肽基因轉(zhuǎn)錄水平的影響進(jìn)行分析。結(jié)果表明在寄生后小菜蛾幼蟲神經(jīng)肽基因的轉(zhuǎn)錄趨勢可以分成上調(diào)型和下降型，而假寄生后的轉(zhuǎn)錄趨勢可以分成平穩(wěn)型和波動型。即在菜蛾盤絨繭蜂寄生后，Adipokinetic hormoneⅠ、Adipokinetic hormoneⅠ、Allatostatin A和AllatostatinC等15個小菜蛾神經(jīng)肽基因在幼蟲腦部的轉(zhuǎn)錄趨勢屬于下降型，而N

6、europeptide-like peptide、Neuroparsin、Leucokinin和I0n transport peptide屬于上調(diào)型;菜蛾盤絨繭蜂假寄生后，Adipokinetic hormoneⅠ、Allatostatin A、CCHamide和Ion transport peptide等14個神經(jīng)肽基因在幼蟲腦部的轉(zhuǎn)錄趨勢屬于平穩(wěn)型，而Leucokinin、Adipokinetic hormoneⅡ、Allatost