丹參及甘草組織培養(yǎng)的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文對丹參和甘草的組織培養(yǎng)進行了初步研究。 1.丹參方面:以丹參的葉片為外植體,誘導出愈傷組織;再從愈傷組織上誘導出不定根。在此基礎上,建立了丹參酮ⅡA和原兒茶醛的高效液相測定方法,并對影響丹參不定根組織培養(yǎng)的一些因素進行了探討。結果如下: (1)確定了丹參不定根的誘導和繼代培養(yǎng)基,為含有3%蔗糖、吲哚丁酸(IBA)2mg·L-1、激動素(KT)0.2mg·L-1的MS培養(yǎng)基。 (2)蔗糖濃度為60g·L-1時,

2、丹參不定根的增殖倍數(shù)最高,為8.0;蔗糖濃度為20g·L-1時,丹參不定根中丹參酮ⅡA的含量最高,為0.012mg·g-1;蔗糖濃度為30g·L-1時,原兒茶醛的含量最高,為0.22mg·g-1。 (3)培養(yǎng)基的初始pH值為6.5時,丹參不定根的生長情況最好,其增殖倍數(shù)為5.1;初始pH值為5.5和6.0時,丹參不定根中丹參酮ⅡA的含量最高,為0.033mg·g-1;初始pH值為5.8時,其原兒茶醛的含量最高,為0.22mg·g

3、-1。 (4)當接種量為2.5%時,丹參不定根的生長情況最好,增殖倍數(shù)為4.0。 (5)培養(yǎng)基中IBA的濃度為2mg·L-1時,丹參的增殖倍數(shù)最高,為4.17;IBA的濃度為2mg·L-1、KT濃度為1mg·L-1時,丹參酮ⅡA的含量最高,為0.19mg·L-1;IBA的濃度為0mg·L-1、KT濃度為0.5mg·L-1時,原兒茶醛的含量最高,為0.34mg·g-1。 (6)當NH4+和NO3-總濃度為60mM·

4、L-1時:NH4+/NO3-為1:4時,不定根的增殖倍數(shù)最高,為5.38;NH4+/O3-為0時,丹參酮ⅡA和原兒茶醛的含量最高,分別為0.037mg·g-1和0.34mg·g-1。 (7)超聲處理對丹參不定根的生長和其次生代謝都有影響。在150W下處理3min時,增殖倍數(shù)最大,為2.01;在300W下處理3min時,其丹參酮ⅡA的含量最高,為0.67mg·g-1,是對照組的20多倍;在500W下處理3min時,其原兒茶醛的含量

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