秦艽組織培養(yǎng)及形態(tài)發(fā)生研究.pdf

1、秦艽是中國(guó)傳統(tǒng)常用中藥,性苦、辛、平,微寒.現(xiàn)代藥理研究表明秦艽具有抗風(fēng)濕、解熱、鎮(zhèn)痛、降壓、抗菌等多種功效.該實(shí)驗(yàn)以秦艽(Gentianamacrophylla Pall.)葉片、胚軸為材料,較系統(tǒng)的研究秦艽組織培養(yǎng)與快速繁殖技術(shù),通過(guò)胚胎發(fā)生途徑建立其植株再生體系,并對(duì)胚狀體發(fā)生過(guò)程從形態(tài)學(xué)、組織學(xué)等方面進(jìn)行了研究,對(duì)應(yīng)用生物技術(shù)繁育秦艽優(yōu)良種苗具有一定的意義.(一)愈傷組織培養(yǎng):在附加一定濃度的BA和NAA的MS培養(yǎng)基上經(jīng)過(guò)2周以

2、上的培養(yǎng),95％以上的秦艽葉片和胚軸外植體可產(chǎn)生綠色愈傷組織.(二)無(wú)菌苗的增殖培養(yǎng):無(wú)菌苗在含1 mg·L<'-1> NAA和1 mg·L<'-1> BA的生長(zhǎng)培養(yǎng)基上培養(yǎng)4周后,幼苗的高度可增長(zhǎng)4.30倍,20％的幼苗可形成叢生芽,4周內(nèi)芽增殖倍數(shù)為2~3倍.(三)不定根的誘導(dǎo):下胚軸、幼葉和不定根在附加3 mg·L<'-1> NAA+0.1 mg·L<'-1>BA的培養(yǎng)基上培養(yǎng)4周后,形成白色、粗短、表面有細(xì)小絨毛的不定根,這些不

3、定根可用于愈傷組織和胚狀體的誘導(dǎo).(四)胚胎發(fā)生:由胚軸誘導(dǎo)產(chǎn)生的淡綠色、生長(zhǎng)迅速的愈傷組織在含NAA和2,4-D的培養(yǎng)基上培養(yǎng)4周后可形成黃白色疏松易碎的胚性愈傷組織.(五)影響胚胎發(fā)生的因素:(1)外植體的影響.(2)植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的影響.(3)球形胚狀體的來(lái)源影響胚狀體成熟.(六)組織學(xué)觀察:通過(guò)連續(xù)石蠟切片觀察胚狀體的形成過(guò)程,結(jié)果發(fā)現(xiàn)秦艽胚狀體的發(fā)育過(guò)程與合子胚的發(fā)育過(guò)程相似,經(jīng)原胚、球形胚、心形胚、魚(yú)雷胚發(fā)育成具子葉的胚狀體