甘藍型油菜耐鹽基因克隆及表達研究.pdf

1、利用基因工程技術培育作物新品種(抗逆和抗病等)是當前生物學研究的熱點之一.擬南芥的Na<'+>/H<'+>逆向轉運蛋白被證實具有將Na<'+>從細胞質轉運到液泡中儲藏的能力,可用于基因工程育種以培育耐鹽作物.為了探索不同植物Na<'+>/H<'+>逆向轉運蛋白基因的耐鹽性,我們選擇十字花科植物中耐鹽性較高的甘藍型油菜滬油15(Brassica napus L.)為材料,利用RACE-PCR克隆技術,成功克隆了甘藍型油菜的Na<'+>/H

2、<'+>逆向轉運蛋白基因BnNHX1(GenBank Acc.No.AY189676).通過相關的生物信息學分析,發(fā)現(xiàn)該基因的核苷酸序列及其推導出的氨基酸序列與十字花科擬南芥及其它植物的Na<'+>/H<'+>逆向轉運蛋白基因有一定的相似性,BnNHX1蛋白與擬南芥的AtNHX1相似性可達87﹪,與Oryza sativa的Na<'+>/H<'+>逆向轉運蛋白相似性可達71﹪;而與Homo sapiens NHE相似性只有29﹪.用TM

3、pred軟件分析BnNHX1蛋白為一跨膜蛋白,有12個穿膜區(qū)域,跨膜區(qū)保守,屬于Na<'+>/H<'+>逆向轉運蛋白家族.Na<'+>/H<'+>逆向轉運蛋白基因是屬于植物耐鹽SOS基因家族中的SOS1基因,在植物耐鹽的SOS途徑中還有SOS2、SOS3基因,為了進一步闡明植物SOS途徑的耐鹽機理,我們以十字花科植物甘藍型油菜滬油15(Brassica napus)為材料,利用RACE-PCR克隆技術,克隆了SOS<,2>基因(Bnso