巴西香蕉和大蕉的愈傷組織誘導(dǎo)及其植株再生的研究.pdf

1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文巴西香蕉和大蕉的愈傷組織誘導(dǎo)及其植株再生的研究姓名：李哲申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：植物學(xué)指導(dǎo)教師：黃學(xué)林20041001中山大學(xué)博士學(xué)位論文巴西香蕉和大燕的愈傷組織誘導(dǎo)及其植抹再生的研究摘要將巴西香蕉(a／usaspDAAAcvBrazil)未成熟雄花外植體接種于胚性愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基中(MS，附加Img／L生物素，1mg／LIAA，1mg／LNAA，4mg／L2，4D，30g／L蔗糖，7g／L瓊脂粉。pH58)，培養(yǎng)

2、56個月后可以誘導(dǎo)出胚性愈傷組織。胚性愈傷組織誘導(dǎo)率為4O％。它們的特點(diǎn)是：愈傷組織淺黃色、易碎、濕潤，一開始呈顆粒狀，多次繼代后逐漸變得細(xì)密，可形成類體細(xì)胞胚。類體細(xì)胞胚轉(zhuǎn)到兩種分化培養(yǎng)基：即以I／2MS含30g／L蔗糖，2g／LGelrite，01mg／[NAA(pM58)，分j5『J添加004、05、2mg／L6一隊(duì)的分化培養(yǎng)基和以sH鹽類含Ms維生素，05mg／LGA。，30g／L蔗糖，2g／LGelrite(pH58)，分別添

3、加004、05、10、2mg／L6BA的分化培養(yǎng)基，誘導(dǎo)三個月以上，未得到植株再生。巴西香蕉末成熟雌花接種于胚性愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)6個半月后可以誘導(dǎo)出胚性愈傷組織和體細(xì)胞胚。胚性愈傷組織誘導(dǎo)率為87％。誘導(dǎo)培養(yǎng)基為Ms基本培養(yǎng)基，內(nèi)含Img／L生物素，100mg／L麥芽提取物，100mg／L谷氨酰胺，11種氨基酸維生素(Okole和Schutz1996)，IAA和NAA各Lmg／L，4mg／L2，4D，30g／L蔗糖，7g／L瓊脂

4、粉(pH58)。組織學(xué)觀察表明，愈傷組織的細(xì)胞為圓形，核大，胞質(zhì)濃厚，分裂旺盛，具有胚性細(xì)胞的特征。體細(xì)胞胚經(jīng)球形胚、梨形胚發(fā)育成盾片型胚，體細(xì)胞胚容易從其所附著的胚性愈傷組織上剝落下來。大蕉(gusaparadisiacaABBLinn)未成熟雄花接種到胚性愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，4～5個月后可誘導(dǎo)出黃色小顆粒狀愈傷組織，誘導(dǎo)率為72％。胚性愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基成分為：Ms附加lmg／L生c_物素，lmg／LIAA，lmg／LNAA，4m

5、g／L2，4D，30g／L蔗糖，7g／L瓊脂粉(pH58)。胚性愈傷組織轉(zhuǎn)移到體細(xì)胞胚誘導(dǎo)培養(yǎng)基中(1／2MS附加10rag／L24D，02mg／LZeatin，30g／L蔗糖，7g／L瓊脂粉，pll58)，培養(yǎng)70天可誘導(dǎo)出體細(xì)胞胚，其發(fā)生率為H3％。由組織學(xué)切片可以觀察到愈傷組織的細(xì)胞為圓形，核大，胞質(zhì)濃厚，分裂旺盛，具有胚性細(xì)胞的特征，在體細(xì)胞胚切片中可觀察到莖端分生，組織j熙端分皇組織等典型肋單予葉植物體細(xì)胞胚鮑組織維槐：體細(xì)胞