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1、射干[Belamcanda Chinesis (L.)DC]屬于鳶尾科(Iridaceae)植物,其干燥根莖可入藥,是最常見的中草藥和經(jīng)濟(jì)作物。僅依靠野生資源遠(yuǎn)遠(yuǎn)無法滿足中醫(yī)藥和醫(yī)藥工業(yè)需求,但采用人工栽培,效率低、周期長(zhǎng)。而采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)可以控制植物生長(zhǎng)環(huán)境,加速繁殖速度,并可以從細(xì)胞培養(yǎng)物中直接提取有效成分。目前還沒有射干組織培養(yǎng)研究的相關(guān)報(bào)道。本文以射干[Belamcanda Chinesis (L.)DC]的幼嫩葉片、莖尖
2、以及假莖為外植體,以MS基本培養(yǎng)基為基礎(chǔ),并附加不同種類和濃度的生長(zhǎng)素(2,4-D,NAA)和細(xì)胞分裂素(6-BA),進(jìn)行了愈傷組織的誘導(dǎo)及從莖尖所誘導(dǎo)的愈傷組織分化不定芽的初步研究,以期為射干的快速繁殖以及為開展射干的道地性研究和分子生物學(xué)基礎(chǔ)研究奠定基礎(chǔ)。
本研究表明,以葉片為外植體的較優(yōu)消毒方法是先用70%酒精消毒30 s,再用2%的次氯酸鈉溶液消毒15 min;以莖尖和假莖為外植體的消毒方法同葉片,消毒時(shí)間為18
3、min;而對(duì)于射干的種子因含有內(nèi)生菌用一般的消毒方法不能徹底滅菌。上述的射干葉片、莖尖和假莖等外植體經(jīng)誘導(dǎo)均能脫分化形成愈傷組織,其中,莖尖作為外植體最易脫分化,假莖、葉片次之,種子較難脫分化。葉片和莖尖及假莖的較優(yōu)愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L 2,4-D,其誘導(dǎo)率分別為43.3%和55.0%;同時(shí)比較了暗培養(yǎng)和光培養(yǎng)對(duì)愈傷組織誘導(dǎo)率的影響,結(jié)果表明愈傷組織誘導(dǎo)階段需要暗培養(yǎng);對(duì)于低溫處理的葉片
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