玉米成熟胚誘導愈傷組織體系的建立.pdf

1、玉米成熟胚是適合進行生物技術研究和改良玉米品種的一個良好受體系統(tǒng)，利用玉米成熟胚為外植體建立再生體系是近來研究中的一個重要領域。玉米成熟胚取材方便，不受時間和數(shù)量的限制，但由于玉米成熟胚比較難進行誘導，其誘導的胚性愈傷組織質量比較差，大多數(shù)品種不易于再生，并且受到品種的限制。因此，研究玉米成熟胚組織培養(yǎng)條件，篩選出較好的玉米品種，建立高效玉米成熟胚再生體系對進行玉米轉基因研究具有重要意義。本試驗通過不同品種（系），不同激素，不同外植體的

2、研究，以尋找成熟胚誘導愈傷組織的最適體系，主要有以下幾方面:
　　1、通過對不同品種（系）的玉米成熟胚愈傷組織誘導影響的研究，結果表明:在4mg/L2，4-D的誘導培養(yǎng)條件下，18-599W的誘導率為53.33％，HI-Ⅱ的誘導率為49.33％，CML295的誘導率為47.33％，宜單947的誘導率為9.33％?？捎^察到，在相同培養(yǎng)條件下，不同品種（系）的愈傷組織生長狀況及誘導率存在顯著差異。18-599W是最適合進行成熟胚愈傷組

3、織誘導的品種（系），其次為CML295、HI-Ⅱ，最差的是宜單947。
　　2、通過IAA、BL、4mg/L2，4-D與BL配比使用時對成熟胚愈傷組織誘導影響的研究，結果表明:在IAA培養(yǎng)條件下，成熟胚愈傷組織的最適濃度為8mg/L，18-599W的誘導率為34.67％，HI-Ⅱ的誘導率為34.00％，CML295的誘導率為32.00％;在BL培養(yǎng)條件下，成熟胚愈傷組織的最適濃度為0.2mg/L，18-599W的誘導率為56.67

4、％，HI-Ⅱ的誘導率為50.00％，CML295的誘導率為52.00％;在4mg/L2，4-D與BL配比使用時的培養(yǎng)條件下，成熟胚愈傷組織的最適合濃度組合為4mg/L2，4-D+0.2mg/LBL，18-599W的誘導率為93.33％，HI-Ⅱ的誘導率為90.00％，CML295的誘導率為88.67％。
　　3、通過不同激素對成熟胚愈傷組織誘導影響的研究，結果表明:18-599W在4mg/L2，4-D+0.2mg/LBL、0.2m

5、g/LBL、4mg/L2，4-D、8mg/LIAA培養(yǎng)條件下的誘導率分別是93.33％、56.67％、53.33％、34.67％。可觀察到，2，4-D+BL配比使用時最適合成熟胚愈傷組織的誘導培養(yǎng)，其次為BL、2，4-D，最差的是IAA。
　　4、不同外植體（根尖、成熟胚、下胚軸、幼葉）誘導愈傷組織的差異比較，結果表明:4mg/L2，4-D與0.2mg/LBL對不同外植體間的誘導愈傷組織效率相近，都具有較好的效果，尤其是4mg/L

6、2，4-D+0.2mg/LBL最適合不同外植體的愈傷組織誘導。以18-599W為例，在4mg/L2，4-D+0.2mg/LBL培養(yǎng)條件下，根尖的誘導率為77.33％，成熟胚的誘導率為93.33％，下胚軸的誘導率為33.33％，幼葉的誘導率為16.00％。可見，成熟胚最適合作為誘導愈傷組織的外植體，其次是根尖，次之是下胚軸，最差的是幼葉。
　　5、對成熟胚和成熟胚誘導出的愈傷組織進行了初步的農(nóng)桿菌遺傳轉化，結果表明:通過該體系培養(yǎng)的