玉米成熟胚誘導(dǎo)愈傷組織體系的建立.pdf

1、玉米成熟胚是適合進(jìn)行生物技術(shù)研究和改良玉米品種的一個(gè)良好受體系統(tǒng)，利用玉米成熟胚為外植體建立再生體系是近來(lái)研究中的一個(gè)重要領(lǐng)域。玉米成熟胚取材方便，不受時(shí)間和數(shù)量的限制，但由于玉米成熟胚比較難進(jìn)行誘導(dǎo)，其誘導(dǎo)的胚性愈傷組織質(zhì)量比較差，大多數(shù)品種不易于再生，并且受到品種的限制。因此，研究玉米成熟胚組織培養(yǎng)條件，篩選出較好的玉米品種，建立高效玉米成熟胚再生體系對(duì)進(jìn)行玉米轉(zhuǎn)基因研究具有重要意義。本試驗(yàn)通過(guò)不同品種（系），不同激素，不同外植體的

2、研究，以尋找成熟胚誘導(dǎo)愈傷組織的最適體系，主要有以下幾方面:
　　1、通過(guò)對(duì)不同品種（系）的玉米成熟胚愈傷組織誘導(dǎo)影響的研究，結(jié)果表明:在4mg/L2，4-D的誘導(dǎo)培養(yǎng)條件下，18-599W的誘導(dǎo)率為53.33％，HI-Ⅱ的誘導(dǎo)率為49.33％，CML295的誘導(dǎo)率為47.33％，宜單947的誘導(dǎo)率為9.33％?？捎^察到，在相同培養(yǎng)條件下，不同品種（系）的愈傷組織生長(zhǎng)狀況及誘導(dǎo)率存在顯著差異。18-599W是最適合進(jìn)行成熟胚愈傷組

3、織誘導(dǎo)的品種（系），其次為CML295、HI-Ⅱ，最差的是宜單947。
　　2、通過(guò)IAA、BL、4mg/L2，4-D與BL配比使用時(shí)對(duì)成熟胚愈傷組織誘導(dǎo)影響的研究，結(jié)果表明:在IAA培養(yǎng)條件下，成熟胚愈傷組織的最適濃度為8mg/L，18-599W的誘導(dǎo)率為34.67％，HI-Ⅱ的誘導(dǎo)率為34.00％，CML295的誘導(dǎo)率為32.00％;在BL培養(yǎng)條件下，成熟胚愈傷組織的最適濃度為0.2mg/L，18-599W的誘導(dǎo)率為56.67

4、％，HI-Ⅱ的誘導(dǎo)率為50.00％，CML295的誘導(dǎo)率為52.00％;在4mg/L2，4-D與BL配比使用時(shí)的培養(yǎng)條件下，成熟胚愈傷組織的最適合濃度組合為4mg/L2，4-D+0.2mg/LBL，18-599W的誘導(dǎo)率為93.33％，HI-Ⅱ的誘導(dǎo)率為90.00％，CML295的誘導(dǎo)率為88.67％。
　　3、通過(guò)不同激素對(duì)成熟胚愈傷組織誘導(dǎo)影響的研究，結(jié)果表明:18-599W在4mg/L2，4-D+0.2mg/LBL、0.2m

5、g/LBL、4mg/L2，4-D、8mg/LIAA培養(yǎng)條件下的誘導(dǎo)率分別是93.33％、56.67％、53.33％、34.67％。可觀察到，2，4-D+BL配比使用時(shí)最適合成熟胚愈傷組織的誘導(dǎo)培養(yǎng)，其次為BL、2，4-D，最差的是IAA。
　　4、不同外植體（根尖、成熟胚、下胚軸、幼葉）誘導(dǎo)愈傷組織的差異比較，結(jié)果表明:4mg/L2，4-D與0.2mg/LBL對(duì)不同外植體間的誘導(dǎo)愈傷組織效率相近，都具有較好的效果，尤其是4mg/L

6、2，4-D+0.2mg/LBL最適合不同外植體的愈傷組織誘導(dǎo)。以18-599W為例，在4mg/L2，4-D+0.2mg/LBL培養(yǎng)條件下，根尖的誘導(dǎo)率為77.33％，成熟胚的誘導(dǎo)率為93.33％，下胚軸的誘導(dǎo)率為33.33％，幼葉的誘導(dǎo)率為16.00％?？梢?jiàn)，成熟胚最適合作為誘導(dǎo)愈傷組織的外植體，其次是根尖，次之是下胚軸，最差的是幼葉。
　　5、對(duì)成熟胚和成熟胚誘導(dǎo)出的愈傷組織進(jìn)行了初步的農(nóng)桿菌遺傳轉(zhuǎn)化，結(jié)果表明:通過(guò)該體系培養(yǎng)的