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1、西南大學(xué)碩士學(xué)位論文蠟梅水通道蛋白基因CpAQP1和CpAQP2的克隆及功能初步分析姓名:張迷申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專(zhuān)業(yè):花卉學(xué)指導(dǎo)教師:李名揚(yáng)20100501兩南大學(xué)碩十學(xué)何論文!II曼曼曼曼曼曼曼曼曼皇曼曼曼曼曼曼曼曼量曼量曼曼曼量曼曼量曼曼曼曼舅曼!曼曼皇皇曼皇曼曼量呂曼皇量量曼曼曼曼皇曼曼曼皇曼量曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼皇舅量曼曼將該基因的cDNA編碼序列連接到植物表達(dá)載體pCAMBLA23019中,通過(guò)PCR驗(yàn)證和XbaI和SacI雙
2、酶切驗(yàn)證,成功構(gòu)建了CpAQPl和CpAQP2基因的植物表達(dá)載體pCAMCpAQPl和pCAMCpAQP2,為進(jìn)一步通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)研究該基因的功能奠定了基礎(chǔ)。3煙草的遺傳轉(zhuǎn)化利用根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的葉盤(pán)法將轉(zhuǎn)入植物表達(dá)載體pCAMCpAQPl和pCAMCpAQP2的農(nóng)桿菌分別導(dǎo)入野生煙草植株基因中,通過(guò)GUS染色、Km抗性篩選和轉(zhuǎn)化煙草DNAPCR擴(kuò)增,獲得轉(zhuǎn)基因植株含CpAQ尸J基因的有9株、含CpAQP2基因的有8株。4轉(zhuǎn)基因植株的脅迫
3、研究通過(guò)025mol/L的NaCI的鹽溶液和20%的PEG6000模擬干旱處理轉(zhuǎn)基因植株和野生對(duì)照煙草植株,觀察其表型(萎蔫狀況)出現(xiàn)的差異,同時(shí)對(duì)脅迫后植株的恢復(fù)狀況進(jìn)行觀察分析。轉(zhuǎn)基因植株較野生對(duì)照植株的抗鹽脅迫能力和抗干旱脅迫能力強(qiáng),說(shuō)明基因CpAQPl和CpAQP2是以結(jié)構(gòu)蛋白存在于植株細(xì)胞中的,在植物處于脅迫狀態(tài)下具有維持體內(nèi)水分平衡、防止?jié)B透?jìng)Φ戎匾饔?,初步判定這2個(gè)基因?qū)}脅迫和干旱脅迫具有一定的適應(yīng)性。關(guān)鍵詞:水通道
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