蠟梅小GTP結合蛋白基因CpRAC1的克隆及功能初步驗證.pdf

1、獨創(chuàng)性聲明學位論文題目：蟥整d ：魚! 里坌僉蛋白基因￡幽旦鮑直隆丞邊韭初步驗證本人提交的學位論文是在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。論文中引用他人已經發(fā)表或出版過的研究成果，文中已加了特別標注。對本研究及學位論文撰寫曾做出貢獻的老師、朋友、同仁在文中作了明確說明并表示衷心感謝。學位論文作者： - 11 約土嘶 簽字日期： 少J 年 ‘月二日學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解西南大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，有權

2、保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權西南大學研究生院( 籌) 可以將學位論文的全部或部分內容編入有關數據庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文。( 保密的學位論文在解密后適用本授權書，本論文：日不保密，口保密期限至 年 月止) 。學位論文作者簽名：j ] 鈞主季導師簽名：多h 妙簽字日期： > 。廳年‘月 2 日 簽字日期：∥細膨年／月2 日西南大學碩士學位淪文

3、3 ．2 ．2 蠟梅C p R A C l 基因c D N A 序列的獲得????????????．1 93 ．2 ．3 蠟梅C p R A C l 基因的生物信息學分析????????????一2 23 ．3 結果與分析??????????????????????????2 23 ．3 ．1 蠟梅( 力刪C ，基因c D N A 的獲得及其序列特征????????．2 23 ．3 ．2 蠟梅@ R A C J 基因編碼蛋白的基本特征預

4、測分析???????一2 43 ．3 ．3 蠟梅C p R A C l 基因編碼蛋白的同源性分析??????????．．2 53 。3 ．4 蠟梅@ R A C l 基因編碼蛋白的聚類分析???????????．．2 63 ．3 ．5 蠟梅C p R A C l 蛋白與擬南芥R A C 蛋白的聚類分析與多重序列比對?．2 83 ．4 討論?????????????????????????????2 9第四章蠟梅C p R A C l 基

5、因的表達特性分析???????????????．3 14 ．1 實驗材料???????????????????????????3 l4 ．2 實驗方法???????????????????????????3 14 ．2 ．1 蠟梅不同組織、不同時期及不同脅迫處理材料的采集?????．3 14 ．2 ．2 總R N A 的提取及c D N A 第一鏈的獲得???????????．．3 24 ．2 ．3C p R A C I 基因表達特性的

6、實時熒光定量分析?????????．．3 24 ．3 結果與分析?????????????????????????．3 44 ．3 ．1 蠟梅總R N A 提取????????????????????．．3 44 ．3 ．2C 匆魁C ，基因的表達特性分析????????????????3 44 ．4 討{ 侖??????????????????????????????????????．．4 0第五章蠟梅c ≯肌c J 基因表達載體的構

7、建及擬南芥遺傳轉化研究??????4 15 ．1 實驗材料???????????????????????????4 15 ．1 。1 植物材料????????????????????????一4 15 ．1 ．2 載體及菌株???????????????????????．4 15 ．1 ．3 試劑盒及主要試劑????????????????????．4 l5 ．1 ．4 自配的主要試劑?????????????????????．4 15

8、 ．2 實驗方法???????????????????????????4 25 ．2 ．1 蠟梅C p R A C l 基因植物超表達載體的構建??????????．4 25 ．2 ．2 農桿菌E H A l 0 5 凍融法感受態(tài)的制備????????????．4 45 ．2 ．3 凍融法轉化農桿菌E H A l 0 5 感受態(tài)細胞???????????一4 45 ．2 _ 4 農桿菌轉化子的P C R 鑒定及反轉化大腸桿菌鑒定????