26428.中樞酸敏感離子通道對呼吸的調(diào)節(jié)及機制研究

1、復(fù)旦大學(xué)博士學(xué)位論文中樞酸敏感離子通道對呼吸的調(diào)節(jié)及機制研究姓名：宋娜娜申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：生理學(xué)指導(dǎo)教師：沈霖霖201004復(fù)旦大學(xué)博士論文中文摘要中樞核團微量注射技術(shù)，在LH注射酸化人工腦脊液激活A(yù)SICs，同時在延髓的孤束核微量注射SB408124阻斷OXlR后，觀察膈神經(jīng)放電活動、血壓、心率的變化。4采用腦立體定位和中樞核團微量注射技術(shù)，成年(6～8w)SD大鼠的LH區(qū)微量注射OrexinSAP特異性損毀該核團的Orexin

2、能神經(jīng)元，觀察大鼠攝食和體重的變化；應(yīng)用電生理實驗觀察核團損毀后，動物的基礎(chǔ)呼吸頻率、血壓和心率的變化，以及酸化刺激LH區(qū)對心血管呼吸系統(tǒng)的調(diào)節(jié)。結(jié)果1ASICl和ASIC2a在成年和新生SD大鼠延髓的表達：(1)免疫組化的結(jié)果顯示：ASICl和ASIC2a免疫反應(yīng)陽性細胞在成年鼠的延髓有廣泛分布：ASICl和ASIC2a免疫反應(yīng)陽性細胞在第四腦室旁的中間核(intercalatednuclusofmedulla，In)以及延髓背側(cè)的楔

3、束副核(externalcuneatenuclus，ECu)都有散在分布，在延髓的頭端腹外側(cè)區(qū)則有著廣泛分布。ASICl和ASIC2a免疫反應(yīng)陽性細胞在新生鼠延髓的表達略有不同：ASICl免疫反應(yīng)陽性細胞主要分布在VLM區(qū)，在延髓背側(cè)的ECu也有散在表達；ASIC2a免疫反應(yīng)陽性細胞也主要分布在VLM區(qū)，但是在延髓背側(cè)未觀察到ASIC2a免疫反應(yīng)陽性細胞。在VLM區(qū)，成年鼠組的ASIC2a免疫反應(yīng)的相對光密度(relativeoptic

4、aldensity，ROD)和陽性細胞數(shù)值均低于新生鼠組的(pO001，n=6)；成年鼠組的ASICl免疫反應(yīng)的ROD值高于新生鼠組(pO001，n=6)而細胞計數(shù)統(tǒng)計結(jié)果顯示成年鼠組的ASICl免疫反應(yīng)陽性細胞數(shù)少于新生鼠組(pO001，n=6)。(2)應(yīng)用Westernblot的方法：在成年鼠和新生鼠延髓都檢測到ASICl和ASIC2a蛋白的表達，ASICl和ASIC2a在成年鼠組延髓的蛋白含量均低于新生鼠組(p001，p0001，

5、n=6)。(3)應(yīng)用免疫熒光雙染和免疫熒光共聚焦實驗方法，在VLM區(qū)觀察到了ASICl和ASIC2a與神經(jīng)纖維絲H的共表達，以及ASICl和ASIC2a的共表達。2ASICl和ASIC2a在成年SD大鼠下丘腦的表達：免疫組織化學(xué)實驗結(jié)果顯示：ASICl和ASIC2a兩個亞單位在成年SD大鼠的下丘腦廣泛表達：ASICl和ASIC2a免疫反應(yīng)陽性細胞在下丘腦背側(cè)區(qū)(dorsalhypothalamusarea，DA)和下丘腦外側(cè)區(qū)(LH)都

6、有分布，但是兩者的分布存在差異性。細胞計數(shù)結(jié)果顯示：LH區(qū)的ASICl免疫反應(yīng)陽性細胞數(shù)多于DA區(qū)(pO001，n=7)，ASIC2a免疫反應(yīng)陽性細胞數(shù)在DA區(qū)多于在LH的分布(p0001，n=7)；在DA區(qū)ASICl免疫反應(yīng)陽性細胞數(shù)少于ASIC2a(p001，n=7)，LH區(qū)ASICl免疫反應(yīng)陽性細胞數(shù)多于ASIC2a(p0001，n=7)。對ASICl和ASIC2a免疫反應(yīng)陽性細胞的相對光密度(ROD)值的分析未發(fā)現(xiàn)兩者在DA區(qū)和