芍藥甙調(diào)節(jié)Oddi括約肌肌細(xì)胞運(yùn)動及鉀離子通道機(jī)制的研究.pdf

1、背景:Oddi括約肌(sphincter of Oddi,SO)位于膽管、胰管和十二指腸結(jié)合部,是膽汁和胰液的最終流出道。由膽總管括約肌、壺腹部括約肌、胰管括約肌和縱肌束組成。Oddi括約肌運(yùn)動是一個動態(tài)的周期性變化過程并于十二指腸移動性運(yùn)動復(fù)合波密切相關(guān)。具有將膽汁胰液排入十二指腸、防止十二指腸內(nèi)容物返流至膽管和胰管內(nèi)以及充盈膽囊的作用。因此Oddi括約肌的運(yùn)動功能是膽道系統(tǒng)動力學(xué)研究的重要內(nèi)容。Oddi括約肌運(yùn)動功能障礙(sphin

2、cter of Oddi dysfunction,SOD)是臨床常見疾病之一,較難診斷和治療。分為Oddi括約肌功能紊亂和Oddi括約肌狹窄兩大類。Oddi括約肌功能紊亂主要是因?yàn)镾O的持續(xù)痙攣造成的。嚴(yán)重的影響了人們的生活質(zhì)量,目前尚無完全有效治療方法。
　　 目前國內(nèi)外的文獻(xiàn)就胃腸平滑肌運(yùn)動機(jī)制的研究比較多,關(guān)于SO的運(yùn)動機(jī)制及其中藥的作用研究甚少。已有文獻(xiàn)報(bào)道證實(shí)芍藥甙對可以通過多種途徑對胃腸平滑肌進(jìn)行調(diào)解1,Oddi括約

3、肌同屬消化道平滑肌,芍藥甙是否具有相同或是相似的調(diào)節(jié)途徑對Oddi括約肌平滑肌進(jìn)行調(diào)節(jié)。我們已經(jīng)開展了對芍藥甙對Oddi括約肌肌環(huán)運(yùn)動的研究,并取得了一定的進(jìn)展。結(jié)果顯示芍藥甙能夠明顯的抑制鉀通道阻滯劑對家兔離體Oddi括約肌肌環(huán)的收縮作用,為了深入研究芍藥甙的作用機(jī)理,我們提取單個Oddi括約肌肌細(xì)胞,直接觀察芍藥甙對平滑肌細(xì)胞的收縮和舒張活動的調(diào)節(jié)作用,以及鉀離子通道的作用機(jī)制。從而在細(xì)胞水平上進(jìn)一步闡明芍藥甙對家兔Oddi括約肌運(yùn)

4、動調(diào)節(jié)的機(jī)制和途徑。
　　 目的:探討電壓依賴性鉀通道(Kv)、ATP敏感性鉀通道(KATP)以及大電導(dǎo)鈣激活鉀通道(Bkca)對家兔Oddi括約肌平滑肌細(xì)胞的作用;探討芍藥甙對家兔Oddi括約肌細(xì)胞的調(diào)控作用。
　　 方法:1.取純種新西蘭兔SO段,用Ⅱ型膠原酶消化獲得單個平滑肌細(xì)胞,進(jìn)行原代培養(yǎng),免疫組織化學(xué)方法鑒定;并通過圖像分析系統(tǒng)測定靜息狀態(tài)細(xì)胞長度。
　　 2.觀察Kv通道阻斷劑4-aminopyri

5、dine(4-AP),KATP阻斷劑Glib,Bkca通道阻斷劑Iberiotoxin(IBTX),對家兔Oddi括約肌平滑肌細(xì)胞的作用;觀察芍藥甙對電壓依賴性鉀通道(Kv)和大電導(dǎo)鈣激活鉀通道(Bkca)阻斷劑收縮作用的影響。
　　 結(jié)果:1.家兔SO平滑肌細(xì)胞平均長度為(143.7±12.3)μm;
　　 2.Kv通道阻斷劑4-AP可以引起家兔Oddi括約肌平滑肌細(xì)胞收縮;并且隨4-AP濃度增加,收縮程度增強(qiáng);

6、>　　 3.Bkca通道阻斷劑IBTX能夠輕度引起家兔Oddi括約肌平滑肌細(xì)胞收縮;
　　 4.KATP阻斷劑Glib引起家兔Oddi括約肌肌細(xì)胞收縮未見統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;
　　 5.4-AP對兔膽道口平滑肌細(xì)胞的收縮作用能夠被芍藥甙抑制,并隨濃度增加,抑制作用增強(qiáng);
　　 6.IBTX對兔膽道口平滑肌細(xì)胞的收縮作用能夠被芍藥甙抑制,并隨濃度增加,抑制作用增強(qiáng);
　　 結(jié)論:1.Oddi括約肌平滑肌細(xì)胞是貼壁