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1、東北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文GsSAMS基因?qū)俎5倪z傳轉(zhuǎn)化及轉(zhuǎn)基因新株系的培育姓名:化燁申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):植物學(xué)指導(dǎo)教師:朱延明20090620東北農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)碩士學(xué)位論文II(2)構(gòu)建植物表達(dá)載體pCSE121個(gè),其上含有強(qiáng)組成型啟動(dòng)子E12調(diào)控的GsSAMS基因。4.農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化選用固殺草作為除草劑,通過三次重復(fù)實(shí)驗(yàn),確定了肇東苜蓿子葉節(jié)不定芽誘導(dǎo)階段篩選壓力為0.5mgL;以肇東苜蓿子葉節(jié)作為外植體
2、,利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將上述構(gòu)建的2個(gè)植物表達(dá)載體pCS29A和pCSE12導(dǎo)入肇東苜蓿,獲得了大量的轉(zhuǎn)GsSAMS基因的抗性植株。(1)質(zhì)粒pCS29A所獲得的抗性植株的抗性芽率為34.25%;(2)質(zhì)粒pCSE12所獲得的抗性植株的抗性芽率為21.25%。5.抗性植株分子生物學(xué)檢測(cè)抗性植株分子生物學(xué)檢測(cè)對(duì)所得的轉(zhuǎn)GsSAMS基因的抗性植株進(jìn)行分子生物學(xué)檢測(cè),包括PCR檢測(cè)和Southern雜交。Southern雜交實(shí)驗(yàn)正在進(jìn)行中。(1)
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