微絲及肌動蛋白mRNA在棉花愈傷組織發(fā)育過程中作用的研究.pdf

1、外植體通過誘導(dǎo)經(jīng)歷脫分化和再分化,最后大致有三種去處:誘導(dǎo)出畸形苗,死亡和誘導(dǎo)出正常植株.已經(jīng)有報道微絲及肌動蛋白mRNA與動植物的發(fā)育有關(guān).因此我們以愈傷組織作為研究植物發(fā)育的材料,觀察微絲及肌動蛋白mRNA在愈傷組織發(fā)育過程中的變化.該研究選取正常棉花的根,已經(jīng)培養(yǎng)了長時間不能分化出正常植株的棉花愈傷組織和棉花畸形苗為材料,采用石蠟切片,通過FITC-鬼筆環(huán)肽對材料微絲熒光染色,結(jié)合熒光顯微鏡觀察.我們發(fā)現(xiàn)在根原分生組織,原形成層和

2、基本分生組織細胞中含有豐富的微絲,微絲呈網(wǎng)狀分布;在愈傷組織細胞中微絲含量少;在畸形苗細胞中含有少量的微絲.因此推測,微絲在細胞中的這種分布可能與愈傷組織不能繼續(xù)誘導(dǎo)出正常的植株而誘導(dǎo)出畸形苗有關(guān).在豌豆肌動蛋白基因編碼區(qū)上切取同棉花肌動蛋白基因編碼區(qū)同源性為82﹪的一段序列為模板,進行地高辛標記合成RNA探針,通過RNA原位雜交技術(shù)對材料進行標記.結(jié)果表明:在根原形成層細胞的細胞質(zhì)中濃度高,在伸長方向兩端的細胞周邊的胞質(zhì)中mRNA濃度

3、高子左右兩側(cè)細胞周邊的胞質(zhì)中mRNA濃度;根基本分生組織細胞中,在細胞核周邊的胞質(zhì)中mRNA濃度高,而細胞周邊的胞質(zhì)中mRNA濃度低;在細胞周邊的胞質(zhì)中mRNA分布是不均一的,細胞伸長方向兩端的mRNA濃度比兩側(cè)高;在愈傷組織分生組織細胞中,在細胞核周邊的胞質(zhì)中mRNA濃度低;在細胞周邊的胞質(zhì)中濃度高并且分布不均勻;愈傷組織薄壁細胞中,在細胞核周邊和細胞周邊的胞質(zhì)中mRNA含量都很低;在細胞周邊的胞質(zhì)區(qū)域,一些區(qū)域弱,甚至一些區(qū)域沒有信