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1、華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文類金屬硫蛋白產(chǎn)生菌的分離培養(yǎng)及特性研究姓名:吳傳松申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):衛(wèi)生檢疫與檢驗(yàn)指導(dǎo)教師:運(yùn)珞珈200905012分別選取不同Zn離子濃度,培養(yǎng)溫度,PH,培養(yǎng)時(shí)間進(jìn)行正交試驗(yàn),對(duì)選定的四株酵母菌進(jìn)行搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)條件的優(yōu)化。(4)對(duì)提取的金屬硫蛋白進(jìn)行Fention反應(yīng),進(jìn)行ZnMT的清除羥自由基能力驗(yàn)證。結(jié)果:(1)經(jīng)酵母菌生化鑒定結(jié)果,比照《酵母菌鑒定手冊(cè)》,表明W1號(hào)菌株為釀酒酵母Sacomyces
2、cerevisiae,W2號(hào)菌株為淺紅紅酵母Rhodotulapallida,W3號(hào)菌株為熱帶假絲酵母Cidatropicalis,W4號(hào)菌株為異常漢遜酵母Hansenulaanomala;(2)通過(guò)Zn離子誘導(dǎo)后,4株不同菌株的金屬硫蛋白測(cè)定值分別為:0.885mgg,0.673mgg,0.591mgg,0.721mgg;(3)通過(guò)對(duì)酵母菌生化鑒定結(jié)果和不同菌株金屬硫蛋白的綜合比較,釀酒酵母菌的類金屬硫蛋白提取量高,且菌體對(duì)人體無(wú)危害
3、;所以選取釀酒酵母菌進(jìn)行搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)條件的優(yōu)化,優(yōu)化結(jié)果表明在Zn離子濃度為30mgL,培養(yǎng)溫度為30C,菌液培養(yǎng)時(shí)間24h,pH為65時(shí),金屬硫蛋白含量為1.366mgg,與培養(yǎng)條件優(yōu)化前0.885mgg相比,提高了約54.35%(4)對(duì)提取的類金屬硫蛋白進(jìn)行抗氧化實(shí)驗(yàn),通過(guò)與抗壞血酸清除羥自由基能力的比較,得出ZnMT在0~50ugmL濃度范圍內(nèi),ZnMT對(duì)羥自由基的清除效果要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于抗壞血酸。達(dá)到同一清除率,需要ZnMT的量也遠(yuǎn)遠(yuǎn)
4、低于抗壞血酸的所需量。結(jié)論:分離,篩選得到具有產(chǎn)類金屬硫蛋白能力的四株酵母菌;通過(guò)對(duì)酵母菌菌種進(jìn)行鑒定,準(zhǔn)確的對(duì)四株菌株進(jìn)行了分類;四株菌分別為W1號(hào)菌株為釀酒酵母Sacomycescerevisiae,W2號(hào)菌株為淺紅紅酵母Rhodotulapallida,W3號(hào)菌株為熱帶假絲酵母Cidatropicalis,W4號(hào)菌株為異常漢遜酵母Hansenulaanomala;通過(guò)對(duì)酵母菌培養(yǎng)條件優(yōu)化,類金屬硫蛋白的產(chǎn)生量從0.885mgg提高
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