2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁(yè)
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1、華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文家蠅金屬硫蛋白的cDNA克隆與序列測(cè)定姓名：朱景全申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：動(dòng)物學(xué)指導(dǎo)教師：雷朝亮牛長(zhǎng)纓20030501ClongingandSequencingofMTcDNAGentinHouseflyLarvae(MuscadomesticuvicinaMacquart)AbstractBasingontheresearchofhouseflyMTbytheInsectResourceInstituteofH

2、umZhongAgriculturalUniversity，WewentfurthertoexplorecloningcDNAsequenceofhouseflyMTgeneIntheexperiment，thefirstinstarhouseflylarvae’metallothioneinmRNAexpressingreachmaximunafterinducedbyCd(2mM)for48hours，thentotalRNAwas

3、extractedWithguanidiniumisothiocyanate，andmRNAwasisolatedbythePolyATtractmRNAIsolationSystemssurplledbyPromegacompanyTheisolatedmRNAwasusedastemplateTwospecificprimersweredesignedandsynthesizedbasedontheconservativeseque

4、ncecontrastedtoDrosophilaandotherspeciesMTgenebycomputerretrieving，whichwerenamedprimerlandprimer2，Thesequenceofprimerlwas：5’CAAGTGAATCATCTCAGTGC3’，andthatofprimer2was：5’TGTAGAGAGACAAGATGCAG3’RT—PCRtechniquewasadopedtosy

5、nthesizingthefirst—bandofcDNA，thesecond—bandofcDNAandexpandingDNAdirectlyonlybyonestepTheexpandingproductswererecoveredbythePCRFt‘a(chǎn)gmentRecoveryKitandthenwereclonedtopMDl8一TvectorsFourwhitebtotswereselectedrandomlythroug

6、hanti—Ampanda—complememtation，andthentherecombinantplasmidswereidentifledbyRestrictionanalysiSofEcoRIandHindIIlandPeRexpandingTwopositivecloneswereSequenced，andtheresulLsshowedttlatitsnucleotidesequenceincludesanopenread

7、ingsegmentwhJchcodesfora45——aminoacidsproreinandthreeendonucleasesiteswhichareBgII、BamlIIandBgIlI，ThisproteinwasidentifiedasmetallothioneinbasedonitscharacteristiCdescribedaboveanditssimilarity(85％)totheMTngeneofDrosophi

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