蘋果UV-B光受體基因MdUVR8的克隆及功能鑒定.pdf

1、UVR8是一類能夠特異性感受環(huán)境中紫外光B(UV-B)的光受體，植物通過其接受UV-B光信號，調控生長發(fā)育過程中的各個方面。UVR8已經(jīng)被證明廣泛存在于高等植物、藻類以及苔蘚中，在擬南芥的研究中證明UVR8能夠調控植物的光形態(tài)建成過程。同樣，光在果樹的形態(tài)建成中也具有重要作用，其中藍光受體隱花色素基因CRY在蘋果中的功能已被鑒定，但是UVR8的相關研究在果樹中研究較少。本研究克隆得到一個蘋果UV-B光受體基因MdUVR8，并對其基因結構

2、特點、表達特異性及其在植物體內的功能等進行了分析和鑒定。主要研究工作與結果如下:
　　1.用RACE法克隆得到蘋果的UV-B光受體基因MdUVR8，該基因的eDNA全長為1957bp，其中ORF區(qū)域為1539 bp，編碼一條含512個氨基酸的多肽，分子量為48.8 kDa。通過氨基酸序列分析表明，MdUVR8與AtUVR8具有保守的蛋白質結構域，都含7個重復的RCC1結構域。
　　2.熒光定量RT-PCR分析表明，MdUVR

3、8在蘋果的各組織和器官中為組成型表達;且該基因的表達受UV-B光信號誘導，暗示MdUVR8基因參與蘋果的光響應。
　　3.功能互補試驗結果表明，MdUVR8能部分恢復擬南芥uvr8突變體中的發(fā)育缺陷及光形態(tài)建成;在野生型擬南芥中過表達MdUVR8，能強化光形態(tài)表型，表示組成型表達的MdUVR8參與植物光形態(tài)建成。
　　4.酵母雙雜交及免疫共沉淀實驗證明，MdUVR8能夠和蘋果MdCOP1蛋白進行互作，為進一步研究蘋果中光信號