益生性尿腸球菌HDRsEf1對(duì)雛雞盲腸菌群發(fā)育的影響.pdf

1、本論文將實(shí)驗(yàn)室分離得到的具有良好益生特性的屎腸球菌HDRsEf1添加在玉米-豆粕基礎(chǔ)日糧中，利用變性梯度凝膠電泳(Denaturing gradient gelel ectrophoresis，DGGE)指紋圖譜技術(shù)來(lái)研究它對(duì)肉雞盲腸菌群發(fā)育的影響，利用Real-timePCR技術(shù)分析了盲腸中特定菌群數(shù)量的變化;同時(shí)本論文還對(duì)正常肉雛雞在7到14日齡發(fā)育過(guò)程中盲腸菌群的具體變化進(jìn)行了研究，并以禽致病性大腸桿菌O78為例，通過(guò)對(duì)組織載菌量

2、的檢測(cè)和組織病變的觀察，對(duì)益生性屎腸球菌HDRsEf1對(duì)雛雞抗禽致病性大腸桿菌的效果進(jìn)行了初步研究。具體研究結(jié)果如下:
　　1益生性屎腸球菌HDRsEf1對(duì)雛雞盲腸菌群發(fā)育的影響
　　試驗(yàn)選用1日齡健康白羽肉雛雞共180只隨機(jī)分成對(duì)照組（玉米-豆粕基礎(chǔ)日糧）、益生組（添加300g屎腸球菌菌粉/1000kg）和抗生素組(添加50mg金霉素/kg)。每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20只。分別在7、14、21、28、35、42日齡無(wú)菌快速

3、采集盲腸內(nèi)容物，用RT-PCR檢測(cè)盲腸中乳酸桿菌和大腸桿菌的數(shù)量，用DGGE技術(shù)檢測(cè)盲腸腸道菌群的變化情況。結(jié)果顯示，益生菌的添加可以顯著降低雛雞21日齡盲腸大腸桿菌的數(shù)量（P＜0.05），顯著增加42日齡盲腸乳酸桿菌的數(shù)量(P＜0.05)。DGGE結(jié)果顯示雛雞盲腸菌群從7日齡到14日齡為一個(gè)過(guò)渡期，從14日齡到42日齡為一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定期。益生菌和抗生素的添加未影響腸道菌群的正常發(fā)育，但益生菌的添加可以促進(jìn)腸道菌群在過(guò)渡期更有效的完成過(guò)渡

4、，在穩(wěn)定期維持更穩(wěn)定的狀態(tài)。
　　2早期肉雛雞盲腸菌群變化規(guī)律的研究
　　試驗(yàn)選用1日齡健康白羽肉雛雞共60只隨機(jī)分成3個(gè)重復(fù)組，每個(gè)重復(fù)20只。使用玉米-豆粕基礎(chǔ)日糧進(jìn)行飼喂，試驗(yàn)周期為14天，分別在7、9、10、11、13、14日齡時(shí)頸靜脈放血處死6只試驗(yàn)雞采集盲腸內(nèi)容物，用DGGE技術(shù)檢測(cè)盲腸腸道菌群的變化情況。UPGMA聚類分析的結(jié)果顯示肉雞盲腸菌群以10日齡為一個(gè)臨界點(diǎn)，在7到9日齡時(shí)為一個(gè)不停變化的過(guò)程，而在10

5、日齡后開(kāi)始趨于穩(wěn)定。DGGE指紋圖譜分析顯示有5個(gè)條帶在此過(guò)程中未出現(xiàn)變化，16SrRNA序列分析表明與這些條帶相對(duì)應(yīng)的細(xì)菌種類分別是Ruminococcuslactari,Azomonasagilis,Propionibacteriumacnes,Streptococcusoralis和Microbacteriumtestaceum。10日齡以后出現(xiàn)了一些特異性條帶，與之對(duì)應(yīng)的細(xì)菌種類主要是Eubacteriumlimosum,Lac

6、tobacilluscrispatus,Corynebacteriumjeikeium和Brachybacteriumsacelli。
　　3屎腸球菌HDRsEf1對(duì)雛雞抗大腸桿菌效果的研究
　　試驗(yàn)選用1日齡健康白羽肉雛雞共60只隨機(jī)分成3個(gè)試驗(yàn)組（對(duì)照組、益生組和抗生素組），每個(gè)試驗(yàn)組20只，在雛雞10日齡口服接種107CFU/mL的大腸桿菌O781mL，在攻毒后72h進(jìn)行載菌量的檢測(cè)和組織病變程度的觀察。載菌量檢測(cè)結(jié)果