基因工程乳酸菌保護(hù)效果檢測(cè)及其在雛雞盲腸內(nèi)定植的研究.pdf

1、吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文基因工程乳酸菌保護(hù)效果檢測(cè)及其在雛雞盲腸內(nèi)定植的研究姓名：趙丹申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：王春鳳20070601吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文 基因工程乳酸菌保護(hù)效果檢測(cè)及其在雛雞盲腸內(nèi)定植的研究P i n t e r ( 1 9 9 8 ) 等從干酪乳酸桿菌中克隆了T h y A 基因，并且對(duì)之進(jìn)行了測(cè)序。以7 7 v A 基因?yàn)檫x擇壓力重新構(gòu)建了質(zhì)粒P U C 9 、P U C l $ 和P K G

2、 S ，以這些衍生質(zhì)粒為載體使許多可溶性蛋白在T h y A - - 的E ．c o l i 中得到了表達(dá)。R o s s 等( 1 9 9 0 )從乳酸球菌中也克隆了T h y A 基因并以此為選擇壓力構(gòu)建了質(zhì)粒p P R l 0 1 、p P R l 0 2 以及其他一系列衍生質(zhì)粒，并導(dǎo)入T h y A 的大腸桿菌中進(jìn)行表達(dá)8 1 。乳酸菌“食品級(jí)”載體表達(dá)系統(tǒng)構(gòu)建的成功，就可以把有利于人和動(dòng)物的各種外源性基因或相關(guān)基因克隆入這種載

3、體中，再導(dǎo)入乳酸菌受體菌中，得到的這種重組工程乳酸菌經(jīng)口服后，重組菌在雞腸道內(nèi)穩(wěn)定地定植和繁衍，使重組抗原和細(xì)胞因子持續(xù)地、穩(wěn)定地、高效地表達(dá)并釋放，從而刺激機(jī)體產(chǎn)生持續(xù)有效的免疫保護(hù)作用，這樣就將集益生菌和基因產(chǎn)物的功能于一體，其科學(xué)意義和應(yīng)用前景將十分廣闊。本研究旨在國(guó)內(nèi)外基因工程疫苗研究的基礎(chǔ)上，采用現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)，克隆綠色熒光蛋白( G F P ) 基因，以球蟲S 0 7 基因?yàn)閳?bào)告基因構(gòu)建非抗生素抗性表達(dá)載體。通過電轉(zhuǎn)化方