華癸中慢生根瘤菌7653R效應(yīng)蛋白NopP的共生功能及蛋白互作研究.pdf

1、根瘤菌可與豆科植物形成根瘤，這種共生關(guān)系的建立涉及根瘤菌與宿主植物之間復(fù)雜的基因表達(dá)調(diào)控、信號識別轉(zhuǎn)導(dǎo)、分子間相互作用等過程。其中根瘤菌的Ⅲ型分泌效應(yīng)蛋白在上述過程中發(fā)揮重要作用。
　　在本室前期工作中，篩選獲得與華癸中慢生根瘤菌（Mesorhizobiumhuakuii)7653RⅢ型分泌效應(yīng)蛋白NopP互作的紫云英宿主蛋白NIP43，通過雙分子熒光互補(bǔ)(BiFC)技術(shù)證實(shí)了二者在煙草細(xì)胞中的蛋白相互作用。針對7653R效應(yīng)蛋白

2、NopP的共生功能及蛋白互作研究，本文取得了如下實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
　　其一，植物盆栽和共生表型檢測發(fā)現(xiàn)，相較于7653R，百脈根中慢生根瘤菌（Mesorhizobiumloti）MAFF303099也可在紫云英上結(jié)瘤，但是共生效應(yīng)差。其表現(xiàn)為較弱的結(jié)瘤能力，葉片偏黃，植株矮小，固氮酶活偏低。然而，7653R不能與百脈根形成共生根瘤。將M.huakuii7653R的nopP基因?qū)隡AFF303099后接種百脈根，其共生表型與接種野生型M

3、AFF303099的植株無顯著性差異。
　　其二，利用酵母雙雜交技術(shù)，分別檢測了廣宿主根瘤菌（Rhizobiumsp）NGR234、慢生型大豆根瘤菌（Bradyrhizobiumjaponicum）USDA6以及費(fèi)氏中華根瘤菌（Sinorhizobiumfredii）USDA257中的NopP同源蛋白與NIP43的互作，發(fā)現(xiàn)B.japonicumUSDA6的NopP與NIP43可以發(fā)生蛋白互作。
　　其三，利用插入突變技術(shù)，