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1、豆科植物能與根瘤菌形成共生根瘤將氮氣轉(zhuǎn)化為氨。由根瘤菌Ⅲ型分泌系統(tǒng)泌出的Ⅲ型蛋白效應(yīng)因子在寄主特異性結(jié)瘤中起著非常重要的作用。NopL(nodulation outer protein L)是第一個被鑒定出來的由根瘤菌NGR234泌出的Ⅲ型蛋白效應(yīng)因子,目前對于它在寄主植物中的分子功能還不甚了解。本論文中,在含有質(zhì)粒pPROEX-InopL的大腸桿菌BL21(DE3)中表達(dá)nopL基因,純化得到帶有6×His標(biāo)簽的NopL重組蛋白并用于
2、免疫兔子得到抗NopL的血清。制備的血清能夠識別重組NopL蛋白(由大腸桿菌中表達(dá))以及根瘤菌NGR234分泌的天然NopL蛋白(由類黃酮誘導(dǎo)的NGR234培養(yǎng)物上清中提取得到)。為了研究NopL在植物細(xì)胞中的功能,用含有質(zhì)粒pTA7002,pTA7002nopL和pTA7002SIPK的農(nóng)桿菌進行了煙草葉片注射轉(zhuǎn)化實驗。結(jié)果表明,在煙草(Nicotiana tabacum)葉片中共同表達(dá)nopL和:MAPK基因SIPK,能夠抑制SIP
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