轉(zhuǎn)基因蘋果對(duì)微生物群落數(shù)量及植株花粉育性影響研究.pdf

1、隨著轉(zhuǎn)基因作物的商品化和種植種類、面積的的不斷增加，以及人類安全意識(shí)的提高，轉(zhuǎn)基因作物的生態(tài)安全問(wèn)題也越來(lái)越引起人們的關(guān)注。本試驗(yàn)選用繼代保存13年的轉(zhuǎn)CpTI基因蘋果組培苗和定植8年的田間轉(zhuǎn)基因植株，研究外源基因在受體植株根系的穩(wěn)定遺傳性;分析外源基因在土壤殘留情況;分析外源基因在土壤可培養(yǎng)微生物存在情況;研究轉(zhuǎn)基因植株對(duì)根際微生物的影響;本實(shí)驗(yàn)室研究發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因蘋果花粉離體萌發(fā)率和花粉生活力都顯著低于非轉(zhuǎn)基因蘋果，本試驗(yàn)通過(guò)顯微觀察轉(zhuǎn)

2、基因蘋果花粉形成過(guò)程，探索導(dǎo)致以上現(xiàn)象的原因。
　　 主要研究結(jié)果如下:
　　 1.對(duì)繼代培養(yǎng)13年的嘎拉、王林、富士共129株轉(zhuǎn)CpTI基因蘋果組培苗的根系進(jìn)行PCR檢測(cè)，結(jié)果表明:129株組培苗的根系均擴(kuò)增出了CpTI特異基因片斷，說(shuō)明外源CpTI基因在轉(zhuǎn)基因蘋果組培苗根系形成過(guò)程中，沒(méi)有發(fā)生丟失。
　　 2.對(duì)定植田間8年的8個(gè)株系的轉(zhuǎn)CpTI基因蘋果的根際土、根圍土、表層土進(jìn)行PCR檢測(cè)，結(jié)果表明:轉(zhuǎn)基因

3、蘋果根際土和根圍土全部檢測(cè)到了CpTI基因;轉(zhuǎn)基因蘋果的表層土的2個(gè)株系檢測(cè)到了外源CpTI基因，說(shuō)明外源CpTI基因在轉(zhuǎn)基因植株根系土壤存在殘留。
　　 3.培養(yǎng)檢測(cè)到外源基因的表層土、根圍土、根際土的微生物，得到262株細(xì)菌、189株放線菌和146株真菌，對(duì)其進(jìn)行PCR檢測(cè)，所有可培養(yǎng)細(xì)菌、放線菌和真菌均沒(méi)有檢測(cè)到外源CpTI基因。
　　 4.用無(wú)菌蛭石∶草炭(1∶1)的基質(zhì)，加入微生物菌肥，統(tǒng)計(jì)栽種30d、60 d

4、和90 d的轉(zhuǎn)基因蘋果（嘎拉、王林、富士）根際土細(xì)菌、放線菌和真菌的數(shù)量，結(jié)果表明:30d時(shí)，轉(zhuǎn)基因蘋果根際土細(xì)菌、真菌數(shù)量顯著高于對(duì)照;60d時(shí)，轉(zhuǎn)基因蘋果根際土真菌數(shù)量顯著高于對(duì)照，轉(zhuǎn)基因王林細(xì)菌數(shù)量顯著低于對(duì)照;90d時(shí)，轉(zhuǎn)基因富士真菌數(shù)量顯著高于對(duì)照，轉(zhuǎn)基因蘋果細(xì)菌數(shù)量與對(duì)照差異不顯著;轉(zhuǎn)基因蘋果根際土放線菌數(shù)量與對(duì)照差異均不顯著。
　　 5.三月中旬至四月上旬，每隔3d采集轉(zhuǎn)基因蘋果的花蕾（花芽），采用石蠟切片法，顯微