不吸水鏈霉菌的生物活性成分分離.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)所選的研究對象是一株來自土壤的不吸水鏈霉菌。前期結(jié)果證明它具有良好的抗菌活性。同時(shí)經(jīng)過初步的化學(xué)分析和檢測，表明此不吸水鏈霉菌所產(chǎn)生的活性物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)不同于以往在鏈霉菌中分離到的化合物。本研究利用多種色譜相結(jié)合的分離方法和波譜結(jié)構(gòu)鑒定技術(shù)，對該株不吸水鏈霉菌發(fā)酵液中的抗菌活性物質(zhì)進(jìn)行了研究。
　　利用多種色譜相結(jié)合的方法對不吸水鏈霉菌的抗菌活性物質(zhì)進(jìn)行了分離和純化。首先對不吸水鏈霉菌發(fā)酵菌液采用大孔吸附樹脂AB-8進(jìn)行粗分

2、，利用水-乙醇系統(tǒng)(1∶0，1∶3，2∶2，3∶1，0∶1)極性由高到低梯度洗脫，每個(gè)濃度進(jìn)行5倍柱體積淋洗，將淋洗液減壓濃縮，獲得6個(gè)組分。然后依據(jù)薄層層析與抗菌活性測定結(jié)果，將75％乙醇層部分和100％乙醇層部分合并，作為主要分離部分。將其溶解后，利用中壓正相硅膠柱層析、葡聚糖凝膠SephadexLH-20柱層析、正相硅膠制備薄層層析、高壓反相硅膠柱層析等方法進(jìn)行分離，獲得5個(gè)化合物。
　　不吸水鏈霉菌活性成分的結(jié)構(gòu)鑒定。采用

3、波譜學(xué)技術(shù)，質(zhì)譜、核磁共振氫譜、核磁共振碳譜對分離得到的化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)解析和鑒定，確定了化合物5的化學(xué)結(jié)構(gòu)，分子量為353.13341，可以推斷出該化合物的分子式為C20H19NO5。
　　以革蘭氏陽性細(xì)菌枯草芽孢桿菌與革蘭氏陰性細(xì)菌花生青枯病菌為供試菌株，采用96孔板連續(xù)稀釋-MTT生物自顯影法測定化合物5的最小抑菌濃度(MIC)。結(jié)果表明，化合物5對枯草芽孢桿菌與花生青枯病菌具有較好的抗菌作用，對枯草芽孢桿菌表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗菌活