miR-148a在豬肝臟中的表達(dá)及功能研究.pdf

1、miRNA是指序列長度在22bp左右的，非蛋白編碼的小分子RNA，它通過與靶基因序列完全或部分互補(bǔ)配，來降解或抑制基因的表達(dá)，從而參與生命過程的調(diào)控。小鼠胚胎干細(xì)胞中沉默Dicer引發(fā)的不良反應(yīng)表明miRNA在生命發(fā)育過程中占據(jù)重要角色。miR-148a在肝臟中特異性高表達(dá)，但其所發(fā)揮的功能作用至今仍然不是很明了。
　　本試驗(yàn)一方面通過熒光定量PCR的方法檢測了金華豬肝臟生長發(fā)育過程中miR-148a及l(fā)et-7i的表達(dá)變化，并對

2、二者在金華豬和大約克豬各組織（心、肝、脾、肺、腎、小腸、胰、皮脂）中的表達(dá)分布做了詳細(xì)的研究;另一方面利用生物信息學(xué)對miR-148a的功能進(jìn)行了初步的分析預(yù)測，并選取了十個(gè)可能的靶基因進(jìn)行細(xì)胞水平上的驗(yàn)證研究，從而更深層次的探討miR-148a在肝臟中所發(fā)揮的功能作用。
　　miR-148a在金華豬肝臟生長過程中的表達(dá)呈現(xiàn)一定的規(guī)律性，即其表達(dá)量在胚胎期最高，并隨著出生后日齡的增加逐漸降低;miR-148a在豬的肝臟中特異性高表

3、達(dá)(P＜0.05);通過進(jìn)一步比較胚胎80天和出生后90日齡的金華豬的各組織中miR-148a的表達(dá)量發(fā)現(xiàn)，所檢測的八個(gè)組織在胚胎期80天的miR-148a表達(dá)量均不同程度高于出生后90日齡(P＜0.05);通過對胚胎80天和出生后90日齡的金華豬和大約克的各組織中的miR-148a表達(dá)量進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)在胚胎80天時(shí)金華豬中的大部分器官（肝、脾、肺、小腸、皮脂）中的miR-148a的表達(dá)量顯著高于大約克(P＜0.05)，而出生后90日齡

4、八個(gè)組織中的表達(dá)量卻低于大約克，且除脂肪外，其余均差異顯著(P＜0.05)。
　　生物信息學(xué)綜合分析表明，miR-148a參與肝臟的生長發(fā)育調(diào)控過程，尤其是在細(xì)胞增殖分化方面。在小鼠胚胎肝細(xì)胞中過表達(dá)miR-148a可以顯著降低Cebpa的表達(dá)量(P＜0.05)。通過進(jìn)一步檢測Cebpa在金華豬肝臟生長過程中的變化得知，Cebpa的表達(dá)趨勢與miR-148a的呈負(fù)相關(guān)。我們推測Cebpa可能是miR-148a的靶基因，在肝臟中mi