雞AMPD1基因多態(tài)性與肌苷酸含量的相關(guān)性分析.pdf

1、風(fēng)味是評(píng)價(jià)肉品品質(zhì)的因素之一，而肌苷酸又是影響風(fēng)味的主要物質(zhì)基礎(chǔ)之一。本研究以快大青麻雞和靈山土雞為研究對(duì)象，利用高效液相色譜技術(shù)測(cè)定了其胸肌肌肉的肌苷酸含量;利用分子生物學(xué)手段對(duì)肌苷酸合成代謝中的關(guān)鍵酶基因AMPD1的單核苷酸多態(tài)性進(jìn)行了篩查，并對(duì)其中的3個(gè)SNP位點(diǎn)進(jìn)行群體遺傳結(jié)構(gòu)及其與肌肉肌苷酸含量關(guān)系的分析;同時(shí)運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)分析了AMPD1基因在肉雞不同組織中的表達(dá)規(guī)律。主要研究結(jié)果如下:
　　 1.胸肌肌

2、肉中肌苷酸含量的測(cè)定與分析
　　 運(yùn)用高效液相色譜技術(shù)測(cè)定和分析靈山土雞和快大青麻雞共計(jì)116只雞胸肌的肌苷酸含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)靈山土雞的肌苷酸含量極顯著高于快大青麻雞(P＜0.01);且在兩品種中，母雞的肌苷酸含量均高于公雞。
　　 2.雞AMP D1基因5'調(diào)控區(qū)和編碼區(qū)SNPs篩查
　　 利用DNA池結(jié)合直接測(cè)序的方法首次對(duì)雞AMPD1基因的5'側(cè)翼遠(yuǎn)端調(diào)控序列和15個(gè)外顯子序列進(jìn)行SNPs全面篩選，發(fā)現(xiàn)在靈山

3、土雞和快大青麻雞中都存在10個(gè)SNPs，分別為C-555A、T-350C、C-214G、G4064A、T5288C、A5573G、T6751C、G6805A、C9228T和C9306T，其中外顯子8中的T6751C為錯(cuò)義突變，導(dǎo)致原來(lái)的絲氨酸(Ser)變?yōu)榘腚装彼?Cys)，該突變只輕微改變了蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)，而未改變其二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu)。
　　 3.雞AMPD1基因的遺傳多態(tài)性及其與IMP含量的相關(guān)性分析
　　 運(yùn)用Bi-

4、PASA和PCR-RLFP技術(shù)對(duì)AMPD1基因的第4064、第5573和第6805三個(gè)多態(tài)位點(diǎn)進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)三位點(diǎn)發(fā)生的均是嘌呤間的轉(zhuǎn)換，且三種基因型在兩個(gè)雞種中均有分布，三個(gè)位點(diǎn)的多態(tài)信息含量均位于0.25和0.5之間，屬于中度多態(tài);雜合度和有效等位基因數(shù)均不高，遺傳一致。
　　 分析AMPD1基因不同位點(diǎn)不同基因型與肌苷酸含量的關(guān)系，結(jié)果表明:對(duì)于SNP4064G-A，靈山土雞的AA型個(gè)體IMP含量顯著高于GG型個(gè)體(P＜0

5、.05)，AG型個(gè)體高于GG型個(gè)體，但差異不顯著;而快大青麻雞三種基因型間彼此均無(wú)差異;兩品種雞的公母雞群體中各基因型間也無(wú)差異。對(duì)于SNP5573A-G，兩品種雞的三種基因型間彼此差異均不顯著，兩雞種中不同性別雞各基因型間也無(wú)差異。對(duì)于SNP6805G-A，靈山土雞的AA型個(gè)體IMP含量顯著高于AG型個(gè)體(P＜0.05)，GG型個(gè)體高于AA型個(gè)體，但差異不顯著;而快大青麻雞AG型個(gè)體的IMP含量顯著高于AA型個(gè)體(P＜0.05)，GG

6、型個(gè)體高于AG型個(gè)體和AA型個(gè)體，但差異不顯著;在靈山土雞公雞群體中，未檢測(cè)到GG型個(gè)體，AA型個(gè)體的IMP含量顯著高于AG型個(gè)體(P＜0.05)，在母雞群體中，AA型個(gè)體顯著高于AG型個(gè)體(P＜0.05)但與GG型個(gè)體差異不顯著;在快大青麻雞公雞群體中，GG型個(gè)體的IMP含量高于AG型個(gè)體和AA型個(gè)體，但差異不顯著，AG型個(gè)體IMP含量顯著高于AA型個(gè)體(P＜0.05);在母雞群體中，GG型個(gè)體高于AG型個(gè)體和AA型個(gè)體，但差異不顯著