Klotho基因多態(tài)性與終末期腎病的相關(guān)性研究.pdf

1、當(dāng)今的醫(yī)學(xué)對腎臟疾病發(fā)生及發(fā)展的基因水平研究尚未廣泛開展，導(dǎo)致預(yù)防及治療相對滯后。這其中包括許多腎臟病患者最終發(fā)展至終末期腎病(End stage renal disease，ESRD)，必須行腎移植或透析維持生命。ESRD患者病亡率極高，死因多為心血管并發(fā)癥。許多研究表明Klotho基因有參與腎臟纖維化、抑制氧化應(yīng)激、調(diào)節(jié)鈣磷代謝等生物學(xué)功能，為此推測ESRD、心腦血管疾病、代謝綜合征及骨質(zhì)疏松可能因Klotho基因多態(tài)性所致，但唯獨(dú)

2、Klotho基因多態(tài)性與終末期腎病易感性的關(guān)系國內(nèi)未見報(bào)道。本研究探索了Klotho基因部分片段的基因多態(tài)性[包括曾經(jīng)報(bào)道的三個(gè)單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)(single nucleotide polymorphism，SNP):rs9536314、rs9527025、rs2149860]與終末期腎病易感性及其并發(fā)癥的關(guān)系。
　　目的:探討Klotho基因部分片段的多態(tài)性與終末期腎病易感性及其并發(fā)癥的關(guān)系。
　　方法:采用病例對照研究

3、設(shè)計(jì)思路，選取215例ESRD患者和170例健康人分別作為病例組和對照組，采集外周血并提取基因組DNA，應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)-基因測序分析(Polymerase chain reaction sequencingbased typing，PCR-SBT)的方法，檢測研究對象Klotho基因1165bp片段的（包括已經(jīng)報(bào)道的rs9536314、rs9527025、rs2149860位點(diǎn)）SNP的基因型，并對ESRD患者進(jìn)行血生化指標(biāo)及頸部血管

4、彩超等測定，比較不同基因型之間各項(xiàng)指標(biāo)的差別。根據(jù)心腦血管疾病、不安腿綜合癥、糖尿病腎病、乙肝及丙肝的是否存在將ESRD患者分組，比較上述基因位點(diǎn)的基因型在各組間的分布。
　　結(jié)果:
　　1、通過采集患者病史及流行病學(xué)信息，發(fā)現(xiàn)ESRD患者中原發(fā)疾病診斷為慢性腎小球腎炎的患者占首位47％(99/215);其次為糖尿病腎病21％(46/215);第三為高血壓腎損害11％(24/215);男∶女=1.55∶1，平均年齡53.39

5、±11.37歲，平均身體質(zhì)量指數(shù)(Body Mass Index，BMI)指數(shù)22.82±3.11;86.7％的ESRD患者存在鈣磷代謝紊亂，73.1％的ESRD患者存在甲狀旁腺功能亢進(jìn)，所有的ESRD患者都存在頸動脈內(nèi)-中膜厚度(Intima-media thickness，IMT)增厚;ESRD患者心血管疾病的患病率33.3％，腦血管疾病患病率為58.6％，不安腿綜合征患病率為21.5％，丙肝患病率(11.8％)明顯高于乙肝患病率(

6、7％)。本研究發(fā)現(xiàn)Klotho244、Klotho424、Klotho430、Klotho562為新發(fā)現(xiàn)的SNP位點(diǎn)。
　　2、基因測序結(jié)果提示，rs9536314、rs9527025在病例組和對照組中各有一例雜合子(TG、GC)，其余均為純合子(TT、GG)，這與國外研究發(fā)現(xiàn)白種人群有20％～31％的雜合子有所不同[3]，rs2149860位點(diǎn)雜合子(AG)在病例組和對照中均占有優(yōu)勢，其余為純合子（AA或GG），且AA基因型頻率

7、大于GG基因型頻率,Klotho424在對照組中發(fā)現(xiàn)2例雜合子(T/G)，其余均為純合子(GG)，Klotho244、Klotho562在病例組和對照組中各有一例雜合子(GA、TG)，其余均為純合子(GG、TT)，Klotho430在病例組中發(fā)現(xiàn)1例雜合子(G/A)，其余均為純合子(GG)，經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析，發(fā)現(xiàn)rs9536314、rs9527025、rs2149860、Klotho244、Klotho424、Klotho430、Klotho

8、562位點(diǎn)的基因型頻率在兩組中均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　3、將ESRD患者按照有無心血管疾病、腦血管疾病、不安腿綜合征、糖尿病腎病分為病例組和對照組，發(fā)現(xiàn)rs9536314、rs9527025、rs2149860、Klotho244、Klotho424、Kletho430、Klotho562位點(diǎn)的基因型頻率在兩組中均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　4、將ESRD患者按照有無乙肝及丙肝分組，發(fā)現(xiàn)rs9536314、rs9527025、rs21

9、49860、Klotho244、Klotho424、Klotho430、Klotho562位點(diǎn)的基因型頻率在兩組中均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　5、將ESRD患者按照有不同基因型分為組，但是rs2149860位點(diǎn)不同基因型患者頸動脈IMT及生化指標(biāo)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　6、頸動脈IMT與ESRB患者心腦血管疾病的發(fā)生無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　結(jié)論:
　　1、中國ESRD患者中原發(fā)疾病所占比例排序?yàn)槁阅I小球腎炎、糖尿病腎病、高血

10、壓腎病、遺傳性腎?。ǘ嗄夷I）、梗阻性腎病、其他疾病;41～70歲人為高發(fā)人群。
　　2、Klotho基因的多態(tài)性存在種族差異，未發(fā)現(xiàn)rs9536314、rs9527025、rs2149860位點(diǎn)及新發(fā)現(xiàn)Klotho244、Klotho424、Klotho430、Klotho562位點(diǎn)多態(tài)性與中國北方漢族人群ESRD患病的相關(guān)性。
　　3、Klotho基因多態(tài)性與中國北方漢族人群ESRD患者心血管疾病、腦血管疾病、不安腿綜合征

11、及糖尿病腎病可能無相關(guān)性。
　　4、ESRD患者中丙肝感染較乙肝感染人數(shù)多，Klotho基因多態(tài)性與中國北方漢族ESRD患者乙肝及丙肝感染可能不存在相關(guān)性。
　　5、86.7％的ESRD患者存在鈣磷代謝紊亂，73.1％的ESRD患者存在甲狀旁腺功能亢進(jìn)，所有的ESRD患者都存在頸動脈IMT增厚，但Klotho基因多態(tài)性與中國北方漢族ESRD患者血管鈣化、鈣磷代謝及甲狀旁腺功能亢進(jìn)可能不存在相關(guān)性。
　　6、頸動脈IMT