啤酒糟面膜的研制畢業(yè)論文

1、<p><b>　　啤酒糟面膜的研制</b></p><p>　　畢業(yè)設(shè)計（論文）任務書</p><p>　　設(shè)計（論文）題目： 啤酒糟蛋白面膜 </p><p>　　學院： 生物工程 專業(yè)： 食品科學與工程

2、 班級： 2007級2班 </p><p>　　1．畢業(yè)設(shè)計（論文）的主要內(nèi)容及基本要求</p><p>　?。?）在常用面膜配方中添加不同比例的啤酒糟蛋白或其酶解產(chǎn)物；</p><p>　?。?）測定樣品的理化性質(zhì)；</p><p>　?。?）檢測樣品的微生物指標；</p><p>　?。?）

3、測定樣品的功能性質(zhì)；</p><p>　　（5）根據(jù)測定結(jié)果初步確定啤酒糟蛋白或其酶解產(chǎn)物的添加比例。</p><p>　　2．指定查閱的主要參考文獻及說明</p><p><b>　　推薦參考文獻資料：</b></p><p><b>　　《生物化學》；</b></p><p&

4、gt;<b>　　《微生物學》；</b></p><p>　　《化妝品工藝學》及有關(guān)專業(yè)期刊和網(wǎng)上資料。</p><p><b>　　3．進度安排</b></p><p>　　注：本表在學生接受任務時下達</p><p><b>　　摘 要</b></p><

5、;p>　　啤酒糟經(jīng)粉碎、過篩、離心可得到啤酒糟蛋白。啤酒糟蛋白酶解150min得到啤酒糟多肽，將啤酒糟多肽與卵磷脂、VE、甘油、凡士林、去離子水等以適當?shù)谋壤{(diào)配成組織形態(tài)均勻的膏體。分別測定理化指標和衛(wèi)生指標，并檢測其還原力和清除羥基自由基能力。結(jié)果表明，啤酒糟多肽制成的面膜理化和衛(wèi)生指標合格，啤酒糟面膜濃度達到2.0mg/mL時，接近于VC 1.0mg/mL濃度時的還原力；0.1g的啤酒糟面膜相當于0.123mgVC的去羥基自

6、由基能力。使用啤酒糟酶解多肽生產(chǎn)啤酒糟面膜具有可行性和功能性。</p><p>　　關(guān)鍵詞：啤酒糟蛋白，蛋白酶解，多肽，面膜</p><p><b>　　ABSTRACT</b></p><p>　　After crushing, screening, centrifugal ,Brewer's spent grains protein

7、 can be extracted from brewer's spent.Brewer's Peptide will be got when brewer's spent grains protein hydrolyzate 150min.Useing the Brewer's peptides together with lecithin, VE, glycerin, petrolatum, deio

8、nized water to deployment into a uniform paste in an appropriate proportion of Morphology.Physical and chemical indicators and health indicators were measured, and determine the reducing power and scavenging ability.The

9、results</p><p>　　Keywords: Brewer's spent grains protein; Hydrolyzate; Polypeptide; Mask</p><p><b>　　目錄</b></p><p><b>　　摘 要I</b></p><p>　　A

10、BSTRACTII</p><p><b>　　目錄III</b></p><p><b>　　第一章前言1</b></p><p>　　1.1啤酒糟的來源以及成分1</p><p>　　1.2啤酒糟的利用現(xiàn)狀1</p><p><b>　　1.3蛋白質(zhì)

11、1</b></p><p>　　1.3.1蛋白質(zhì)的定義1</p><p>　　1.3.2蛋白質(zhì)的性質(zhì)1</p><p><b>　　1.4多肽2</b></p><p>　　1.4.2多肽的保存2</p><p>　　1.4.3多肽的溶解性3</p><p

12、><b>　　1.5面膜3</b></p><p>　　1.5.1面膜的定義以及原理3</p><p>　　1.5.2面膜的起源3</p><p>　　1.5.3面膜的功能3</p><p>　　1.5.4面膜的急救真相4</p><p>　　1.5.5面膜的成分4</p&

13、gt;<p>　　1.5.7面膜的發(fā)展趨勢7</p><p>　　1.5.8紅酒面膜8</p><p>　　1.6立題依據(jù)和意義8</p><p>　　第二章 材料與方法10</p><p>　　2.1實驗原材料和主要試劑10</p><p>　　2.1.1 實驗原材料10</p>

14、<p>　　2.2主要儀器設(shè)備11</p><p>　　2.3啤酒糟蛋白面膜的制作11</p><p>　　2.3.1啤酒糟蛋白提取的工藝流程以及制取啤酒糟多肽的方法11</p><p>　　2.3.1.1啤酒糟蛋白提取工藝11</p><p>　　2.3.1.2啤酒糟多肽制取方法11</p><p

15、>　　2.3.2啤酒糟面膜的配制12</p><p>　　2.3.2.1啤酒糟面膜的配方12</p><p>　　2.3.2.2啤酒糟面膜的配制方法12</p><p>　　2.4.1菌落總數(shù)的檢測12</p><p>　　2.4.1.1檢測程序12</p><p>　　2.4.1.2操作步驟13&l

16、t;/p><p>　　2.4.1.3菌落總數(shù)計算方法14</p><p>　　2.4.2還原力的檢測15</p><p>　　2.4.3清除羥基自由基能力的檢測15</p><p>　　第三章 結(jié)果與討論16</p><p>　　3.1啤酒糟面膜的配制16</p><p>　　3.2菌落數(shù)

17、的檢測16</p><p>　　3.3抗氧化能力的檢測16</p><p>　　3.3.1還原力的測定16</p><p>　　3.3.2清除羥基自由基能力的測定17</p><p><b>　　第四章結(jié)論19</b></p><p><b>　　參考文獻20</b&g

18、t;</p><p><b>　　致謝21</b></p><p><b>　　第一章前言</b></p><p>　　1.1啤酒糟的來源以及成分</p><p>　　啤酒糟主要由麥芽的皮殼、葉芽、不溶性蛋白質(zhì)、半纖維素、脂肪、灰分及少量未分解的淀粉和未洗出的可溶性浸出物組成，，是一種低成本、食品

19、級的廢物[1]，占啤酒工業(yè)總副產(chǎn)物的85%[1]。啤酒生產(chǎn)所采用原料的差別以及發(fā)酵工藝的不同，使得啤酒糟的成分不同，因此在利用時要對其組成進行必要的分析?？偟膩碚f，啤酒糟含有豐富的粗蛋白和微量元素，具有較高的營養(yǎng)價值。謝幼梅等（1995）分析指出，啤酒糟干物質(zhì)中含粗蛋白25.13%、粗脂肪7.13%、粗纖維13.81%、灰分3.64%、鈣0.4%、磷0.57%；在氨基酸組成上，賴氨酸占0.95%、蛋氨酸0.51%、胱氨酸0.30%、精氨

20、酸1.52%、異亮氨酸1.40%、亮氨酸1.67%、苯丙氨酸1.31%、酪氨酸1.15%；還含有豐富的錳、鐵、銅等微量元素。</p><p>　　1.2啤酒糟的利用現(xiàn)狀</p><p>　　從目前國內(nèi)外研究動態(tài)來看，啤酒糟的利用途徑主要有：①直接生產(chǎn)蛋白制品，②開發(fā)飼料，③培植食用菌、配制肥料和建材等[2]。</p><p><b>　　1.3蛋白質(zhì)<

21、;/b></p><p>　　1.3.1蛋白質(zhì)的定義</p><p>　　蛋白質(zhì)是生物體中廣泛存在的一類生物大分子，由核酸編碼的α氨基酸之間通過α氨基和α羧基形成的肽鍵連接而成的肽鏈，經(jīng)翻譯后加工而生成的具有特定立體結(jié)構(gòu)的、有活性的大分子。泛指某一類蛋白質(zhì)，與前面的限定詞組成復合詞時，一律用“蛋白質(zhì)”，如血漿蛋白質(zhì)、纖維狀蛋白質(zhì)、酶蛋白質(zhì)等，此時“質(zhì)”字不得省略(習慣詞除外，新命名者

22、從此)。凡指具體蛋白質(zhì)時，“質(zhì)”字可省略，如血紅蛋白、肌球蛋白等。</p><p>　　1.3.2蛋白質(zhì)的性質(zhì)</p><p>　　溶解性：蛋白質(zhì)分子的直徑很大，達到了膠體微粒的大小，所以，蛋白質(zhì)溶液具有膠體的性質(zhì)。</p><p>　　水解：蛋白質(zhì)在蛋白酶作用下，經(jīng)水解反應，生成氨基酸。</p><p>　　鹽析：少量的鹽（如硫酸銨、硫酸

23、鈉等）能促進蛋白質(zhì)的溶解，但如向蛋白質(zhì)溶液中加入濃的鹽溶液，可使蛋白質(zhì)的溶解度降低而從溶液中析出。這種作用叫做鹽析。這樣析出的蛋白質(zhì)在繼續(xù)加水時，仍能溶解，并不影響原來蛋白質(zhì)的性質(zhì)。</p><p>　　變性：蛋白質(zhì)受熱、紫外線、X射線、強酸、強堿、重金屬(如鉛、銅、汞等)鹽、一些有機物(甲醛、酒精、苯甲酸)等的作用會凝結(jié)，這種凝結(jié)是不可逆的，即凝結(jié)后不能在水中重新溶解，這種變化叫做變性。</p>

24、<p>　　顏色反應：蛋白質(zhì)可以跟許多試劑發(fā)生顏色反應。例如，有些蛋白質(zhì)跟濃硝酸作用時呈黃色。</p><p>　　蛋白質(zhì)的灼燒：蛋白質(zhì)被灼燒時，產(chǎn)生具有燒焦羽毛的氣味[3]。</p><p><b>　　1.4多肽</b></p><p>　　1.4.1多肽的定義</p><p>　　多肽是α－氨基酸以肽

25、鏈連接在一起而形成的化合物，它也是蛋白質(zhì)水解的中間產(chǎn)物。由兩個氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫做二肽，同理類推還有三肽、四肽、五肽等。通常由10~100氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫多肽。它們的分子量低于10，000Da（Dalton道爾頓），能透過半透膜，不被三氯乙酸及硫酸銨所沉淀。也有文獻把由2~10個氨基酸組成的肽稱為寡肽（小分子肽）；10~50個氨基酸組成的肽稱為多肽；由50個以上的氨基酸組成的肽就稱為蛋白質(zhì)。</p&g

26、t;<p>　　1.4.2多肽的保存</p><p>　　多肽類保健食品只需置于陰涼干燥處即可。</p><p>　　對于多肽試劑和多肽類藥物則需要保存在干燥器中。在將它們暴露于空氣之前， 冷凍干燥多肽可以放于室溫。這將是濕度影響減少，當無法冷凍干燥時，最好的方法是以小的工作樣量存放。對于含Cys，MetorTrP的多肽試劑，脫氧緩沖劑對其溶解必不可少，因為這種多肽試劑可易空

27、氣氧化，在封瓶前，慢慢流過多肽試劑的氮氣或氬氣也會降低氧化作用。含Gln或Asn的多肽試劑也容易降解，所有這些肽與不含這些有問題解苷的那些肽相比，生命期有限。</p><p>　　多肽具廣泛的溶解性。多肽不溶的主要問題是形成二級結(jié)構(gòu)。除了最太肽外，這點都會發(fā)生，在有多重疏水殘基的肽中更顯著。鹽會促進二級結(jié)構(gòu)形成。我們建議先在無菌蒸餾水或去離子中溶解多肽。如需要增加溶解率，可用聲處理。溶解仍有問題，加少量稀乙酸（1

28、0%）或氨水，會便于溶解。</p><p>　　要長期保存多肽試劑，最好冷凍干燥，冷干粉可在-20℃或更低存放幾年而很少或無降解。溶液中的多肽遠不穩(wěn)定。多肽易受細菌降解，應用無菌純化水溶解。</p><p>　　含有Met，Cgs或Try殘基的多肽溶液由于氧化，壽命有限。應溶于無氧溶劑，為防止重復凍融的破壞，建議溶解過量的肽的便實驗，其余多肽以固體形成保存。</p><

29、p>　　1.4.3多肽的溶解性</p><p>　　大多數(shù)肽的首選溶劑是超純抽氣水。稀乙酸或氨水分別對于堿性或酸性多肽的溶解很重要。這些方法不溶的多肽， 需要DMF、脲、guanidiniam chloride或acetonitrnle來溶解，這些溶劑可能某些實驗有副作用。所以我們建議設(shè)計多肽時要加注意。</p><p><b>　　1.5面膜</b></

30、p><p>　　1.5.1面膜的定義以及原理</p><p>　　面膜是一種敷在臉上的美容護膚品，有的敷后經(jīng)過20～30分鐘，便會形成一層緊繃在臉上的薄膜，所以稱做面膜。但是，有的面膜干燥后不形成膜；不能整塊地掀起來，只能用水把它洗掉，準確地說，這些面膜應該叫做敷面涂劑，但習慣上，因為操作和效果跟做面膜是一樣的，也就籠統(tǒng)地歸到一起叫面膜了。</p><p>　　面膜的原

31、理，就是利用覆蓋在臉部的短暫時間，暫時隔離外界的空氣與污染，提高肌膚溫度，皮膚的毛孔擴張，促進汗腺分泌與新陳代謝，使肌膚的含氧量上升，有利于肌膚排除表皮細胞新陳代謝的產(chǎn)物和累積的油脂類物質(zhì)，面膜中的水分滲入肌膚表皮的角質(zhì)層，皮膚變得柔軟，增加彈性。肌膚自然光亮有彈性，呈現(xiàn)好氣色[4]。</p><p>　　1.5.2面膜的起源</p><p>　　面膜的歷史起源：舉世聞名的埃及艷后晚上常常

32、在臉上涂抹雞蛋清，蛋清干了便形成緊繃在臉上的一層膜，早上起來用清水洗掉，可令臉上的肌膚柔滑、嬌嫩，保持青春的光彩。據(jù)說，這就是現(xiàn)代流行面膜的起源。中國唐代“回眸一笑百媚生”的楊貴妃，傳言她美艷動人，除飲食起居等生活條件優(yōu)越外，還得益于她常用的專門調(diào)制的面膜。楊貴妃的面膜并不難做：用珍珠、白玉、人參適量，研磨成細粉，用上等藕粉混合，調(diào)和成膏狀敷于臉上，靜待片刻，然后洗去。說是能去斑增白，去除皺紋，光澤皮膚。看來，簡便易做、效果明顯的美容面

33、膜，很早以前便為愛美的女士爭相采用，不斷改進，沿用至今。在美容化妝品中，面膜屬于最早出現(xiàn)的一種。</p><p>　　1.5.3面膜的功能</p><p>　　面膜不僅僅有滋養(yǎng)的作用。一個好的面膜，它具有很好的滋養(yǎng)效果，另一點，它還可以去掉你肌膚表面的老死角質(zhì)層。因此，面膜的最大功效是在滋養(yǎng)的同時調(diào)整你的皮膚紋理，剝除表皮的老死細胞，使皮膚紋理光滑，毛孔更為細致；呈現(xiàn)清新，亮麗的容貌。&l

34、t;/p><p>　　各種功能的面膜會讓肌膚得到很好的護理，如清潔，保濕，美白，去角質(zhì)修復，營養(yǎng)等等，每個人都可針對自己的肌膚情況找到相應的面膜，擁有健康潤澤的肌膚。而一張合適的面膜，可以幫助你改善面部的肌膚。</p><p>　　經(jīng)過測試，使用過面膜的臉頰會比沒做過的臉頰更光澤，并且有彈性。</p><p>　　1.5.4面膜的急救真相</p><

35、p>　?。?）把濕潤的面膜敷在臉上，面膜里的物質(zhì)就把皮膚緊緊地包裹起來，讓皮膚與外界的空氣阻隔開，一方面讓水分緩緩地滲透入表皮的角質(zhì)層，同時也防止膜內(nèi)的水分很快丟失，讓角質(zhì)層的細胞在濕潤的環(huán)境中“喝個夠”，使深層細胞的膠原質(zhì)吸足水分，這樣皮膚便會柔軟起來，增加彈性。與此同時，皮膚表面“鋪上了被子”，會暖和起來，毛細血管慢慢擴張，于是加速了皮膚深層的血液微循環(huán)，增加了表皮各層細胞的活力，一除疲憊的老態(tài)。</p><

36、;p>　?。?）在做面膜的過程中，皮膚與外界空氣阻隔開，皮膚表面的溫度有所升高，也會使毛孔擴張，促進汗腺的分泌，這樣就有利于把毛孔里沾染的外界灰塵、化學污染物質(zhì)和微生物清除個同樣也有利于排除表皮細胞新陳代謝產(chǎn)生的廢物和積累得過多的油脂類物質(zhì)。緊跟著，面膜在形成膜時，它的膠黏性成分就會把皮膚表面和毛孔里的污垢、化學污染物、廢物、油脂等有害于皮膚健康的“毒”物黏附在一起徹底清除。</p><p>　?。?）面膜

37、敷在臉上慢慢干燥后形成薄膜，在這過程中緩緩地把皮膚適度地收緊，增加張力，形成一種良好的刺激，讓皮膚上的皺紋舒展開來。小的皺紋看不見了，大的深的皺紋顯得小了、成了，整個面容也就顯得年輕了。</p><p>　?。?）濕潤的面膜敷在臉上，并停留一段時間，這就方便了營養(yǎng)性或功效性的物質(zhì)滲透進入皮膚的深層。與此同時，毛細血管的擴張，血液微循環(huán)的增加，會大大促進細胞對面膜中營養(yǎng)性或功效性物質(zhì)的吸收和利用。正是考慮到這種優(yōu)異

38、的效果，人們便把這樣那樣的營養(yǎng)性或功效性物質(zhì)添加進面膜里，以期取得更好的效果。這么一來，面膜除了上面講到的基本功效外，按照添加進來的物質(zhì)。還可以增強或增加各種各樣的功效，如彈力保濕、緊致提拉、保濕潤膚、美白去斑、防皺抗衰老、消炎排毒、防治暗瘡等。</p><p>　　1.5.5面膜的成分</p><p>　　面膜中一般成分有封閉劑、吸濕劑、親水基質(zhì)、防光劑、乳化劑、防腐劑、香料、脂質(zhì)體&l

39、t;/p><p><b>　　封閉劑：</b></p><p>　　可以在皮膚表面形成封閉薄膜，用以減少TEWL，成分主要為油脂類。一般護膚品保濕劑中常用的封閉劑成分：石蠟油、礦物油、石蠟、角鯊烷、硅油脂肪醇、蠟脂、多元醇：丙二醇等。其中石蠟油是最有效的封閉劑之一；而羊毛脂因為價格較貴、氣味特殊以及有潛在致接觸性皮炎作用而應用較少；硅油是一種較新的制劑，不油膩、基本無味、

40、較少引發(fā)過敏及痤瘡，故市售保濕劑中應用較多。</p><p>　　（2）吸濕劑：吸濕劑的作用機制是從真皮及外界環(huán)境中吸收水分，保存于角質(zhì)層中。如果讓吸濕劑從外界環(huán)境中吸收水分，皮膚周圍相對濕度至少達到70%，而在實際中相對濕度是不能達到這一水平的，故局部外用的吸濕劑大多是從真皮而非環(huán)境中吸收水分。吸濕劑主要包括:甘油、蜂蜜、乳酸鈉、尿素、丙二醇、山梨糖醇、吡咯烷酮羧酸、動物膠、透明質(zhì)酸、維生素及蛋白質(zhì)等。<

41、/p><p>　　（3）親水基質(zhì)：親水基質(zhì)特指的是吸濕劑中一些能與水結(jié)合的大分子，能保持水分及封阻作用，包括透明質(zhì)酸、硫酸軟骨素、膠原、彈力蛋白及DNA等。富含這些親水基質(zhì)的保濕劑可以從真皮中吸取大量水分并與之結(jié)合，無論在低濕度還是在高濕度條件下，都具有相同的高吸濕性。</p><p>　?。?）防光劑：防光劑能防止細胞損傷及脫水。與光老化有關(guān)的紫外線主要是中波紫外線(UVB)和長波紫外線(U

42、VA)，皮膚被照射后可產(chǎn)生自由基，科婷保濕這些自由基經(jīng)氧化或交聯(lián)作用損傷DNA，造成皮膚干燥、脫屑、脆性增加以及修復功能減退。防光劑分物理性與化學性兩種?？奇檬婷艚∧w修復乳液物理性防光劑成分包括氧化鋅、二氧化鈦，化學性防光劑又稱吸收性防光劑，成分有對氨基苯甲酸酯、水楊酸酯及二苯酮等。市售防光產(chǎn)品成分多以化學性防光劑為主。</p><p>　　（5）乳化劑：乳化劑是保濕劑中的主要輔助成分，用于使原本不相溶的幾種液體

43、乳化形成均一的混合物，如油和水，常用的乳化劑有甘油單酯、甘油雙酯、磷脂等。 科婷新活奇跡神仙水乳化劑目前仍是外用劑型中應用最多的基質(zhì)。</p><p>　　（6）防腐劑：羥苯甲酸酯類、能釋放甲醛的化合物、一些絡合劑如依地酸(EDTA)、KathonCG(Methylisothiazolinone和methylchloroisothiazolinone的混合物)、以及酒精等，這些物質(zhì)雖有良好的防腐作用但常常成為接觸

44、性皮炎的原因。</p><p>　?。?）香料：香料用于掩飾原有成分味道或還可產(chǎn)生宜人味道，但某些香料會產(chǎn)生皮膚刺激癥狀。</p><p>　　（8）脂質(zhì)體：脂質(zhì)體呈雙殼球狀，直徑小于5微米，雙殼含與皮膚細胞膜類似成分，球芯為水溶性保濕劑、維生素或其他藥物。脂質(zhì)體作為藥物載體能較好的包裹親水或親油性藥物，提高藥物的滲透性增加藥物在皮膚中的滯留量，降低藥物對皮膚的刺激性。近20年來，皮膚局部

45、用脂質(zhì)體制劑日益引起關(guān)注，脂質(zhì)體在保濕劑中的應用是皮膚護理產(chǎn)品中的一個較新的進展。</p><p>　　1.5.6面膜的分類</p><p>　　從使用過程中按是否成膜分為，凝結(jié)性面膜、膠原面膜、非凝性面膜。</p><p>　　凝結(jié)性面膜包括硬膜、軟膜、啫哩和蜜臘面膜：這類面膜涂敷一段時間后，面膜凝結(jié)，可整體剝離。其功能A、使面膜中的有效成分充分滲透。B、將皮膚分

46、泌物阻隔于膜體內(nèi)，達到使皮膚保濕的目的。C、促進血液循環(huán)，增強皮膚彈性。</p><p>　　原面膜：面膜似一張彈性，伸縮性較強的軟紙，吸濕后會縮水并將有效成分釋放。其功能1、補充皮膚的膠原與彈力素等營養(yǎng)成分，使皮膚光滑細膩，恢復彈性。2、收縮毛孔，舒展軟紋。3、漂白皮膚，減少色斑。4、補充皮膚水份使皮膚滋潤。</p><p>　　非凝性面膜：非凝性面膜包括礦物面膜，果蔬面膜，海藻顆粒面膜

47、，取材廣泛，使用方便，操作簡捷，但消除面膜時要反復用清水漂潔。其功能1、軟化角質(zhì)果細胞，給角質(zhì)層補充水份及營養(yǎng)．使皮膚滋潤。2、增強皮膚張力，舒展細碎皺紋。3、可充分利用純天然物質(zhì)，使皮膚透氣性強。</p><p>　　從產(chǎn)品的物理性狀上可分為，膏狀面膜、液狀面膜、絹(紙)質(zhì)面膜、粉狀面膏狀面膜（非成面膜）：使用效果雖然不錯，而且不用調(diào)和，敷用也簡單，在家庭中有一定的市場。但因制作技術(shù)含量低，產(chǎn)品真假難辨，加上卸

48、膜時非常麻煩(要用去離子水洗)，在美容院不太受歡迎，已經(jīng)逐漸被市場淘汰。</p><p>　　液狀面膜（揮發(fā)成膜型）：主要成分是聚乙烯醇和羧甲基纖維素鈉，靠溶劑的揮發(fā)成膜，具有良好的成膜性，前兩年曾大行其道，但保濕效果差和用時感覺不舒服，使用者越來越少。</p><p>　　絹（紙）質(zhì)面膜：是近年市場上出現(xiàn)的新寵，源于日本sK-II。該產(chǎn)品是將精華素或其他有效成分浸透到以特殊材料制成的基質(zhì)

49、上，敷到所需部位即可。基質(zhì)可以裁成各種形狀，以適應不同部位。絹膜具有使用方便、衛(wèi)生的特點，其市場份額愈來愈大，但不能深度潔膚的缺陷，又使得該產(chǎn)品的應用受到很大限制。</p><p>　　粉狀（自凝成膜型）面膜：可以說是目前市場上最完美的面膜產(chǎn)品，他可以與許多功能性原料、天然提取物等有效成分配伍，達到美容和治療同步的目的，其本身的海藻多糖，膠原質(zhì)，AG因子等，就有著強烈的美白效果使用時只要按一定比例加入清水或牛奶，

50、調(diào)和后敷到所需部位，幾分鐘后即可自動凝結(jié)成一張帶彈性的膜，品質(zhì)優(yōu)良的面膜可以完整的揭取下來其良好的保濕性，滲透性，使其他的面膜望塵莫及。在作面膜的過程中，不僅可以起到美白的作用，還可以在揭膜酌同時將毛孔里的污垢帶出來，達到深度潔膚的效果，好的面膜揭取后面部幾乎沒有殘留物，受到美容師的極大歡迎。</p><p>　　1.5.7面膜的發(fā)展趨勢</p><p>　　材質(zhì)升級越來越薄、越來越貼&l

51、t;/p><p>　　眾所周知，貼式面膜精華載體已無紡布為主。無紡布的選擇成為能否發(fā)揮面膜效果的重要手段。當前，市場上流行的面膜多已30g-70g厚度的混紡無紡布為主。但近年來流行的純棉無紡布、天絲無紡布，以其更貼膚的完美效果，大大改善了貼式面膜“貼合度”不夠的軟肋，成為市場面膜新寵。</p><p>　　配方升級 從植物萃取到漢草名方</p><p>　　護膚品的技術(shù)

52、研發(fā)，主要表現(xiàn)在配方中功效添劑的改進，更純萃、更天然、更安全、更有效是研發(fā)人員追求無止境的目標。隨著中國經(jīng)濟對世界影響的擴大，中國文化正在被世界更廣泛的接納，中醫(yī)藥文化就是其中之一，在化妝品行業(yè)也不例外，甚至于韓國和日本在這一領(lǐng)域的研發(fā)更超前。傳統(tǒng)中藥配方護膚品正在逐步流行，面膜產(chǎn)品也緊隨其后。</p><p>　　安全升級 更多天然、更少刺激、護膚接近零負擔</p><p>　　面膜產(chǎn)品

53、使用越來越廣泛，正由原來深層滋養(yǎng)護理品成為日常保養(yǎng)品。由面膜產(chǎn)品能即時補充營養(yǎng)、改善肌膚狀況的特點，對于肌膚易敏感的人來說總是或有擔心。面膜安全升級也成為面膜流行趨勢。面膜配方的安全除了成份盡量使用天然植物萃取成份、活性成份、天然礦物成份等之外，由于面膜精華的基礎(chǔ)配方以水為基質(zhì)，水成份選擇也越來越被重視，溫泉、礦泉、海泉等成份都已在面膜中廣泛應用。更重要的是，面膜產(chǎn)品的無刺激實驗是保證產(chǎn)品安全的重要手段，目前，人體血紅蛋白刺激實驗是全球

54、公認的護膚品無刺激實驗主要方法。小身材大智慧，面膜設(shè)計趣味變身。面膜的高效護理能力，相信誰都不會否認，但你想敷得不太一樣又效果出眾，那就快來試試我們?yōu)槟銉?yōu)選的這幾款智慧面膜吧，它們將滿足你的所有想象，讓你在護膚的親密接觸中享受趣味帶來的快感。</p><p>　　T+U的美妙組合怎么看都有趣</p><p>　　T區(qū)油光，U區(qū)松弛也能一并解決？對，這個你可沒聽錯，它的神奇之處可就在這兒，組

55、合面膜充分考慮T位、U位不同區(qū)域的肌膚需求，上片面膜以T區(qū)為中心，既調(diào)節(jié)T位的油光，緊致毛孔，賦予肌膚水嫩滋潤：又增加U位的亮白保濕，面膜提拉面部輪廓，恢復易松弛的U區(qū)肌膚彈力，為臉部帶來前所未有的驚喜效果。</p><p>　?。?）3D分體式設(shè)計營養(yǎng)一滴也不落</p><p>　　調(diào)查顯示，顴骨區(qū)、鼻唇線及嘴角這三個面部關(guān)鍵區(qū)域的肌膚最易松弛，同時對女性外表年齡的影響也最大。所以這款綜

56、合素質(zhì)很高的面膜就派上了用場，針對這三個區(qū)域，它突破性地采用了3D式的分體設(shè)計，能包裹并緊貼面部輪廓，頸部凹凸位置，連鼻翼，法令紋等細微部分都能充分照顧，讓上下兩片中的面膜成分一滴不落地完全滲入到肌膚中，用完后你會發(fā)現(xiàn)，不僅對松弛有立竿見影的效果，皮膚都特別光滑瑩潤了。</p><p>　　針對下眼瞼的SOS神奇護理</p><p>　　如果你既想護理臉部，又急待解決嬌嫩的眼部問題，那么這

57、款面膜可是極佳的選擇?？蓜e小看這分布于下眼周的兩小片面膜，里面含有超多的精純維A抗衰老精華，可以即刻解決眼部疲勞問題，連紋路都即刻感到平展，果凍感質(zhì)地的柔膠式設(shè)計，讓肌膚擁有更加柔滑的觸感，就像剝了殼的水煮蛋般嫩滑有光澤。</p><p>　　雙耳掛設(shè)計蘋果臉也能小一圈</p><p>　　普通面膜沒有拉提設(shè)計，無法兼顧下巴部位，而且更易滑落。如果想要迅速改變這種窘境，那就趕緊試試這款提拉

58、效果超贊的神奇面膜吧，獨特的雙耳掛設(shè)計，可以將臉部邊緣及下巴完全包覆，瞬間就會感到提拉的效果，臉也感覺小了一圈，長期使用會有提升臉部輪廓，瘦臉以及呵護頸部細紋的作用。</p><p><b>　　1.5.8紅酒面膜</b></p><p>　　近年來紅酒面膜以其神奇的美容護膚效果被廣大女性推崇，各大品牌也紛紛推出了紅酒面膜產(chǎn)品。葡萄帶有天然的紅色色澤，其含有豐富的抗氧

59、化多酚，能夠增強肌膚抵抗力，并促進肌膚血液循環(huán)，使肌膚看上去白皙紅潤[5]。紅酒多酚對皮膚的好處有：對抗活性氧放入侵犯，維持細胞膜及皮膚構(gòu)造的完整；抑制原蛋白分解酶及其他各類分解酶，抗肌膚老化；降低皮膚受刺激所引起的發(fā)炎反應；抑制酪氨酸酶活性，減少黑色素生成，讓肌膚美白；維持血管張力，防止微血管曲張，促進脂肪與糖類的代謝，消除橘皮組織現(xiàn)象[3]。</p><p>　　1.6立題依據(jù)和意義</p>&

60、lt;p>　　啤酒糟是啤酒工業(yè)的主要副產(chǎn)品，是以大麥為原料，經(jīng)發(fā)酵提取籽實中可溶性碳水化合物后的殘渣。每生產(chǎn)1t啤酒大約產(chǎn)生1/4t的啤酒糟，我國啤酒糟年產(chǎn)量已達1000多萬t，并且還在不斷增加。我國是世界第二大啤酒生產(chǎn)國，有近千家啤酒廠，年產(chǎn)啤酒50M他，其全部副產(chǎn)物約可達9.2Mt；通常這些副產(chǎn)物如廢酵母等均伴以大量的廢水排出，如處理利用不當，將會造成嚴重的環(huán)境污染[4，5]。近年來，我國啤酒工業(yè)迅速發(fā)展，年產(chǎn)啤酒超過3500

61、萬t，產(chǎn)生了約1800萬t的啤酒糟，并且還在不斷增加。</p><p>　　啤酒糟中固形物含量一般為15％-20％，水分含量高，極易腐敗變質(zhì)，給處理和綜合利用帶來很大問題。長期以來，大多數(shù)廠家主要是將濕糟作為粗飼料直接低價出售，其收益甚微；有少數(shù)廠家則是將濕糟直接排放，不僅造成嚴重的環(huán)境污染，還導致資源的浪費。</p><p>　　隨著啤酒規(guī)模的日益增大發(fā)酵廢渣的處理已成為啤酒工業(yè)的重大課

62、題，在發(fā)達國家由于受環(huán)境保護法的嚴格制約，啤酒糟的利用得到了高度重視。我國除少數(shù)廠家將其烘干作飼料外，大部分廠家以低價直接出售給農(nóng)戶作飼料，這既是對蛋白質(zhì)資源的極大浪費，又嚴重地污染了環(huán)境，所以啤酒糟的綜合利用是急待開發(fā)的頓域。</p><p>　　目前，國內(nèi)外與啤酒糟相關(guān)的文章只有一少部分是關(guān)于啤酒糟中蛋白類物質(zhì)的研究。根據(jù)宗緒巖（啤酒糟蛋白抗氧化肽的酶法制備及其體外抗氧化活力）可知，啤酒糟蛋白酶解150min

63、時具有最強的還原力[1]。本論文根據(jù)這一結(jié)論，研制啤酒糟蛋白面膜，將啤酒糟蛋白酶解150min酶解150min后得到啤酒糟多肽，與卵磷脂、VE、甘油、凡士林、去離子水以適當?shù)谋壤{(diào)配成組織形態(tài)均勻的膏體。檢測其衛(wèi)生指標和抗氧化能力。</p><p><b>　　材料與方法</b></p><p>　　2.1實驗原材料和主要試劑</p><p>

64、　　2.1.1 實驗原材料</p><p>　　啤酒糟：取自月華啤酒廠</p><p><b>　　主要試劑</b></p><p><b>　　2.2主要儀器設(shè)備</b></p><p>　　2.3啤酒糟蛋白面膜的制作</p><p>　　2.3.1啤酒糟蛋白提取的工藝流程

65、以及制取啤酒糟多肽的方法</p><p>　　2.3.1.1啤酒糟蛋白提取工藝</p><p>　　圖2-1 啤酒糟蛋白提取工藝流程圖</p><p>　　Fig. 2-1 Flow chart of extraction brewer's spent grains protein</p><p>　　2.3.1.2啤酒糟多肽制取方法

66、</p><p><b>　　用中性蛋白酶</b></p><p>　　將啤酒糟蛋白酶解150min，得到啤酒糟多肽。</p><p>　　2.3.2啤酒糟面膜的配制</p><p>　　2.3.2.1啤酒糟面膜的配方</p><p>　　經(jīng)試驗，表2-1中的配方為最優(yōu)配方：</p>

67、<p>　　表2-1 面膜的最優(yōu)配方</p><p>　　Table2-1 The best formula of the mask</p><p>　　注：一粒VE膠丸含0.1g。</p><p>　　2.3.2.2啤酒糟面膜的配制方法</p><p>　　將稱量好的卵磷脂置于燒杯中，用移液管加去離子水2.00mL，放置在60℃

68、水浴箱里，用玻棒攪拌至完全溶解。</p><p>　　加入VE，攪拌至完全溶解。</p><p>　　加入稱量好的凡士林、甘油，攪拌至均勻狀態(tài)。</p><p>　　將啤酒糟多肽加入（3）所得的組織中，攪拌均勻。</p><p>　　攪拌均勻后，將所得面膜放在室溫下冷卻至室溫，保存?zhèn)溆谩?lt;/p><p>　　2.4啤酒

69、糟面膜的各項指標檢測</p><p>　　2.4.1菌落總數(shù)的檢測</p><p>　　2.4.1.1檢測程序</p><p>　　菌落總數(shù)的檢驗程序見圖2-2。</p><p>　　2.4.1.2操作步驟</p><p>　　1、無菌水培養(yǎng)基的制備</p><p>　　將99mL0.85%Na

70、cl溶液裝入錐形瓶加棉塞，包扎好，與培養(yǎng)基儀器放入滅菌鍋121℃20min。</p><p><b>　　2、樣品的稀釋 </b></p><p>　?。?）制備面膜懸液 稱取 1 g 樣品置盛有 99 mL 無菌水的錐形瓶內(nèi)，振蕩5～10min，是面膜充分打散，即成為10-2的面膜懸液。</p><p>　?。?）稀釋 用無菌移液管吸 1

71、0-2的樣品懸液1 mL ，吹入 9 mL 無菌水中即為10-3稀釋液，如此重復，可依次制成10-3～10-7的稀釋液。注意：操作時管尖不能接觸液面，每一個稀釋度換一支試管，每次吸入樣品液后，要將移液管插入液面，吹吸3次，每次吸上的高度要高于前一次，以減少稀釋中的誤差。</p><p><b>　　3、倒平板，接種</b></p><p>　　及時將 15 mL～20

72、 mL 冷卻至 46 ℃的平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基（可放置于 46 ℃±1 ℃恒溫水浴箱中保溫）傾注平皿，并轉(zhuǎn)動平皿使其混合均勻。</p><p>　　分別取10-3～10-7的稀釋液各0.2mL，分別接入培養(yǎng)基平板中，每個稀釋度做兩個平皿。同時，分別吸取 1 mL 空白稀釋液加入兩個無菌平皿內(nèi)作空白對照。 </p><p><b>　　4、培養(yǎng) </b><

73、;/p><p>　　（1）待瓊脂凝固后，將平板翻轉(zhuǎn)，36℃±1℃培養(yǎng)48 h±2 h。</p><p>　?。?）菌落計數(shù):可用肉眼觀察，必要時用放大鏡或菌落計數(shù)器，記錄稀釋倍數(shù)和相應的菌落數(shù)量。菌落計數(shù)以菌落形成單位（colony-forming units，CFU）表示。 </p><p>　　（3）選取菌落數(shù)在 30 CFU～300 CFU之間

74、、無蔓延菌落生長的平板計數(shù)菌落總數(shù)。低于 30 CFU的平板記錄具體菌落數(shù)，大于 300 CFU的可記錄為多不可計。每個稀釋度的菌落數(shù)應采用兩個平板的平均數(shù)。 </p><p>　?。?） 其中一個平板有較大片狀菌落生長時，則不宜采用，而應以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數(shù)；若片狀菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均勻，即可計算半個平板后乘以2，代表一個平板菌落數(shù)。 </p>&l

75、t;p>　?。?）當平板上出現(xiàn)菌落間無明顯界線的鏈狀生長時，則將每條單鏈作為一個菌落計數(shù)。</p><p>　　2.4.1.3菌落總數(shù)計算方法</p><p>　　（1）若只有一個稀釋度平板上的菌落數(shù)在適宜計數(shù)范圍內(nèi)，計算兩個平板菌落數(shù)的平均值，再將平均值乘以相應稀釋倍數(shù)，作為每 g（mL）樣品中菌落總數(shù)結(jié)果。 </p><p>　?。?）若有兩個連續(xù)稀釋度的

76、平板菌落數(shù)在適宜計數(shù)范圍內(nèi)時，按公式（1）計算： </p><p>　　…………………………………（1） </p><p><b>　　式中： </b></p><p>　　N——樣品中菌落數(shù)； </p><p>　　∑C——平板（含適宜范圍菌落數(shù)的平板）菌落數(shù)之和； </p><p>　　n1—

77、—第一稀釋度（低稀釋倍數(shù)）平板個數(shù)； </p><p>　　n2——第二稀釋度（高稀釋倍數(shù)）平板個數(shù)； </p><p>　　d——稀釋因子（第一稀釋度）</p><p>　　2.4.2還原力的檢測</p><p>　　參照Nichole等所用方法略有改動，進行還原力的測定。在2.5mLpH6.6磷酸鹽緩沖液中加入啤酒糟蛋白面膜1g、1%鐵氰

78、化鉀2.5mL，混勻后50℃恒溫20min，再加2.5mL10%三氯乙酸，然后3000r/min離心分離10min，取上層清液，稀釋10倍和0.1%氯化鐵0.5mL，在700nm測定吸光值。以維生素C作為標準對照，制作標準曲線，樣品的抗氧化能力表現(xiàn)為等值的維生素C[6]。</p><p>　　2.4.3清除羥基自由基能力的檢測</p><p>　　采用 Smirnoff等的方法進行測定。取

79、2mL4.5mmol/LFeSO4，加2mL4.5 mmol／L水楊酸-乙醇溶液，再加不同濃度的待測溶液0.2mL，最后加入2mL4.4 mmol／LH2O2啟動整個反應。37℃水浴中反應0.5h，以蒸餾水作參比，在510nm下測定吸光值?？紤]到待測溶液本身的吸光值不同，以蒸餾水代替H202作為待測溶液的本底吸收值。并與抗壞血酸的清除羥基自由基能力進行比較。清除率(％)=[A0-(AX-AXo)]／Ao×l00%，其中A0：2

80、mLFeSO4 + 2 mL水楊酸-乙醇溶液+0.2 mL 蒸餾水+2mL H2O2，AX：2mLFeSO4+2mL楊酸-乙醇溶液+0.2mL不同濃度樣品+2 mLH2 O2 ；AX0：2mLFeSO4+2mL水楊酸-乙醇溶液+0.2mL不同濃度樣品+2mL蒸餾水[7]。</p><p><b>　　結(jié)果與討論</b></p><p>　　3.1啤酒糟面膜的配制<

81、;/p><p>　　綜合以上實驗，微粒不溶于面膜各物質(zhì)，采用乙醇作為溶劑、超聲波促溶的方式溶解性仍不好，在藥店購買藥品級的維生素E膠丸進行試驗。</p><p><b>　　3.2菌落數(shù)的檢測</b></p><p>　　檢測結(jié)果如表3-1所示</p><p><b>　　表3－1 檢測結(jié)果</b>&l

82、t;/p><p>　　Table3-1 Test results</p><p>　　3.3抗氧化能力的檢測</p><p>　　3.3.1還原力的測定</p><p>　　還原力是表征物質(zhì)抗氧化能力的一個重要指標。具有還原力的物質(zhì)能夠同鐵離子/鐵氰化鉀復合物反應，并還原成能夠用分光光度計進行測量的亞鐵形式（Yi等，2008）。</p>

83、;<p>　　圖3-1啤酒糟面膜還原能力</p><p>　　Fig. 3-1 Reducing power of the brewer's spent grains mask</p><p>　　分別取配置好的啤酒糟面膜樣品和VC用去離子水分別配置成0.5-2.5mg/mL濃度的溶液，按照還原力的測定方法分別進行測定，并繪制成圖3-1。</p><

84、;p>　　從試驗數(shù)據(jù)中可以看出，在試驗范圍內(nèi)啤酒糟面膜的還原力一直低于同濃度的VC，啤酒糟面膜樣品的還原力與其濃度有較好的線性關(guān)系（r=0.9707）。當啤酒糟面膜的濃度達到2.0mg/mL時，其還原力達到0.780，接近于VC1.0mg/mL濃度時的還原力。實驗表明啤酒糟面膜具有很好的還原能力。當不添加啤酒糟多肽時，吸光值是0.210。</p><p>　　3.3.2清除羥基自由基能力的測定</p&

85、gt;<p>　　利用H2O2和Fe2+混合發(fā)生Fenton反應，可生成具有很高反應活性的羥基自由基。Fenton試劑產(chǎn)生OH·的機理：Fe2++H2O2→Fe3++OH-+OH·</p><p>　　OH·+Fe2+→Fe3++OH-</p><p>　　Fe3++H2O2→ Fe2++HO2·+H+</p><p

86、>　　Fe3++HO2·→ Fe2++O2+H+</p><p>　　Fe2++OH·→ Fe3++OH-</p><p>　　羥基自由基能被水楊酸有效地捕捉并生成有色物質(zhì)，在510nm處有最大吸收。但若加入具有清除自由基作用的物質(zhì)，便會與水楊酸競爭，從而使有色生成物減少。下圖（圖3-2）是VC清除自由基能力的標準曲線。</p><p>　

87、　圖3-2Vc的羥基自由基清除能力</p><p>　　Fig.3-2 Scavenging activity of Vc on hydroxyl radical</p><p>　　從試驗數(shù)據(jù)（圖3-2）可以看出，對于VC在低濃度時，羥基自由基的消除率隨著濃度的增加而增加；在0.8 mg/mL至1.2 mg/mL范圍內(nèi)出現(xiàn)平臺期。取1g啤酒糟蛋白面膜加水至10mL，離心，將上層清液過濾，

88、取濾液進行實驗。經(jīng)測定0.1g啤酒糟蛋白面膜的清除率是30.22%，大約相當于0.123mg的抗壞血酸清除羥基自由基的能力。當不添加啤酒糟多肽時，清除率是9.85%。</p><p><b>　　第四章結(jié)論</b></p><p>　　化妝品的滅菌一般是添加酒精或防腐劑，這款面膜未添加酒精和任何防腐劑，微生物檢測指標合格，特別適合對酒精過敏的人群。</p>

89、<p>　　通過檢測其抗氧化能能力，選擇了一種還原力測試方法和清除羥基自由基能力的測定方法。當啤酒糟面膜的濃度達到2.0mg/mL時，其還原力達到0.78，并具有良好的量效關(guān)系。但是清除羥基自由基的能力較弱，0.1g啤酒糟蛋白面膜相當于0.123mg抗壞血酸的去自由基能力。經(jīng)常使用這種具有還原力的面膜，可降低皮膚的氧化程度，具有延緩衰老的作用，并且未添加對皮膚有任何傷害的化學藥品，長期使用也不會對皮膚有傷害。</p&

90、gt;<p><b>　　參考文獻</b></p><p>　　[1] 宗緒巖，劉長江，李麗，劉玲.啤酒糟蛋白抗氧化肽的酶法制備及其體外抗氧化活力.沈陽農(nóng)業(yè)大學學報，2010-04，41:231</p><p>　　[2] 王平，孟范平，李科林，吳曉芙，胡曰利.啤酒工業(yè)副產(chǎn)物綜合利用研究現(xiàn)狀.中南林學院學報.1998-06，18(2):62</

91、p><p>　　[3] 楊晶.葡萄酒中重要生物活性物質(zhì)的研究進展[J].國外醫(yī)學衛(wèi)生學分冊，2008，35（4）：235-238</p><p>　　[4] 孫金榮，劉武明.啤酒生產(chǎn)廢水的綜合治理探討.環(huán)境保護，1995(11):8～10</p><p>　　[5] 李泉瑞，翁飛，朱安珂.工業(yè)企業(yè)環(huán)境保護.北京：冶金工業(yè)出版社，1992.160～166</p

92、><p>　　[6] Nichole C.， Ying Z.， Marian N.， et al. 2008. Antioxidant activity and water-holding capacity of canola protein hydrolysates. Food Chemistry， 109(1): 144-148</p><p>　　[7] Smirnoff，N ．；C

93、umbers，Q．J．Hydroxyl radical scavenging activity of compatible solutes．Phytochm，1989，28，1057-1060．</p><p><b>　　致謝</b></p><p>　　四年的大學生活是我人生中最重要、最燦爛的的美好時光，因為努力、成功、失敗、挫折讓我變得更豐富、更充實。使我得益與

94、良師的教導和益友的幫助。學校提供的各種資源讓我的個人能力得到很大的提高，人生觀、價值觀也更加成熟。在即將走完大學生涯之際，向大學四年中給予我精神和物質(zhì)上幫助的每一位師長和同學表示誠摯的謝意。</p><p>　　做畢業(yè)論文，是對我大學四年學習的檢驗，也是展示自我的平臺。給自己的大學生活交上一份圓滿的答卷。論文的順利完成得益于各方面的幫助。在最開始選擇論文課題的時候我很茫然，我不知道論文該從何做起，也沒有目的和方向

95、，首先感謝宗緒巖老師，在論文方面給了我方向性的指導，他對學生耐心講解的熱情和對科研工作的熱忱讓我深深的感動。做實驗，真正培養(yǎng)了我發(fā)現(xiàn)問題、處理和解決問題的能力，也鍛煉了實際的工作能力，對將來走上工作崗位奠定了堅實的基礎(chǔ)。在實驗過程中，實驗室嚴謹?shù)淖黠L熏陶著我。同學們和老師孜孜不倦的身影影響著我，讓我不感有絲毫的懈怠。在實驗過程中，面對困難我?guī)缀跸胍艞?，是老師耐心的指導和幫助，同學的互相信任和鼓勵，讓我鼓起勇氣堅持了下來。當實驗成功時，

96、讓我有一種的強烈的成就感，心中充滿了陣陣的暖意。讓我的大四生活過得充實而愜意。</p><p>　　再次感謝實驗室老師衛(wèi)春會，她盡職盡責的為我準備一切實驗藥品和儀器，從我進入實驗室就耐心細致地的教我實驗操作的基礎(chǔ)知識。</p><p>　　感謝家人對我的一路支持，他們的支持和鼓勵是我源源不斷的精神支柱！讓我以最飽滿的精神迎接每一次機遇和挑戰(zhàn)，我相信我的努力沒有白費，我的付出將會得到應有的回