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1、由于環(huán)境的破壞,對(duì)于植物抗脅迫能力的研究越來(lái)越受關(guān)注,而許多研究發(fā)現(xiàn)存在于C3植物中光呼吸對(duì)于植物體的抗性有著重要的作用,關(guān)閉光呼吸途徑的植物體在受到外界脅迫時(shí),更容易受到破壞。水稻作為我國(guó)主要糧食作物之一,一直是人們關(guān)注的重點(diǎn),特別是水稻的高產(chǎn)和抗性問(wèn)題,現(xiàn)在人們通過(guò)構(gòu)建具有C4光合途徑的水稻來(lái)提高產(chǎn)量和水稻的抗逆性。而同時(shí)PEPC作為C4途徑的一個(gè)關(guān)鍵酶,也是C3轉(zhuǎn)C4的一個(gè)重點(diǎn),而轉(zhuǎn)入了pepc基因的水稻是否其光合的抗脅迫能力會(huì)增
2、強(qiáng)呢?如果抗性增強(qiáng)了,這是否又與光呼吸有關(guān)呢?
本實(shí)驗(yàn)以日本稻Kitaake(簡(jiǎn)稱WT)和轉(zhuǎn)pepc基因水稻(簡(jiǎn)稱PC)兩種水稻為材料,當(dāng)水稻葉片第六葉全展時(shí),分別測(cè)定其在正常狀態(tài)下和受到外界脅迫時(shí)的光呼吸的差異。實(shí)驗(yàn)處理分為:一組在其第六葉全展時(shí)用強(qiáng)光(2000μmolm-2s-1)處理葉片2小時(shí),另一組在正常的水稻培養(yǎng)液中加入160mM氯化鈉,處理8小時(shí),再在原處理的基礎(chǔ)上再分別用異煙肼和NaHSO3兩種光呼吸抑制劑處理3
3、0分鐘,比較WT和PC兩種水稻第六葉片的光合氣體交換參數(shù)、葉綠素?zé)晒鈪?shù)、葉綠素含量,光呼吸的比例,PEPCase,乙醇酸氧化酶,RuBPCase和RuBPOase活性的高低,Rubisco大亞基含量以及光呼吸途徑的三種代謝產(chǎn)物的相對(duì)含量。最后認(rèn)為,轉(zhuǎn)pepc基因水稻的抗性高于野生型(WT),而光呼吸在其中具有一定的作用。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn):(1)無(wú)論在2000μmolm-2s-1強(qiáng)光處理下,還是在160mM氯化鈉處理下,PC的光
4、合氣體參數(shù):光響應(yīng)曲線,凈光合速率(Pn)和CO2羧化效率都高于WT,處理后的PC的Pn為18μmolCO2m-2s-1和16μmolCO2m2s-1,而WT只有15μmolCO2m-2s-1和13μmolCO2m-2s-1,但CO2補(bǔ)償點(diǎn)卻是WT(80.6μmolmol-1,89.3μmolmol-1)要高于PC(76.4μmolmol-1,82.6μmolmol-1),這也證明了PC水稻的抗高光強(qiáng)和抗鹽脅迫要優(yōu)于WT,用光呼吸抑制劑
5、處理后,發(fā)現(xiàn)PC凈光合速率(Pn)上升的要大于WT,由此推測(cè)PC的光呼吸要大于WT。(2)各種處理下的熒光參數(shù)顯示,受到脅迫后的PC水稻的光合系統(tǒng)生理指標(biāo)要優(yōu)于WT,這也顯示了PC水稻的抗性的確要優(yōu)于WT。(3)處理后的WT和PC,測(cè)定其RuBPCase活性以及Rubisco大亞基含量,結(jié)果顯示,PC總體要優(yōu)于WT,這也證明了PC的抗性確實(shí)要優(yōu)于WT。(4)在用高光強(qiáng)和鹽處理后,測(cè)定光呼吸值,乙醇酸氧化酶和RuBPOase活性,結(jié)果顯示
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