益生菌、葡聚糖對(duì)不同冷應(yīng)激狀態(tài)下貴妃雛雞生理生化指標(biāo)、免疫及HSP70表達(dá)的影響研究.pdf

1、冷應(yīng)激是北方地區(qū)養(yǎng)殖場(chǎng)中常易出現(xiàn)的問題，尤其是在早春育錐產(chǎn)仔過程中對(duì)新生動(dòng)物危害更為嚴(yán)重。貴妃雞是一種珍貴家禽，具有良好的養(yǎng)殖前景，但是有關(guān)冷應(yīng)激對(duì)其生理生化及免疫功能指標(biāo)的影響還未見詳細(xì)報(bào)道。本文以健康貴妃雛雞為研究對(duì)象，研究在比正常飼養(yǎng)溫度低10℃冷應(yīng)激狀態(tài)下貴妃雛雞生長(zhǎng)、血液參數(shù)及血清生化指標(biāo)等生理生化動(dòng)態(tài)變化，白細(xì)胞分類、免疫器官中肥大細(xì)胞數(shù)量和IL-2mRNA表達(dá)等免疫指標(biāo)動(dòng)態(tài)變化以及應(yīng)激蛋白HSP70mRNA表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化，

2、同時(shí)觀察益生菌、β-葡聚糖處理對(duì)上述指標(biāo)的影響，探討具有免疫調(diào)節(jié)作用的新型飼料添加劑益生菌和葡聚糖是否有抗冷應(yīng)激作用，為提高珍禽抗冷應(yīng)激能力措施的提出奠定理論基礎(chǔ)。通過試驗(yàn)我們獲得如下結(jié)果：
　　 (1)益生菌和葡聚糖處理明顯影響冷應(yīng)激狀態(tài)下貴妃錐雞生理生化變化。益生菌處理2h后哈氏腺指數(shù)明顯升高。急性冷應(yīng)激能引起雛雞血紅蛋白、紅細(xì)胞和白細(xì)胞總數(shù)等血液學(xué)參數(shù)的明顯波動(dòng)，益生菌處理有明顯雙相調(diào)節(jié)作用，使之趨于平衡。冷應(yīng)激后血清γ-

3、谷氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(r-GT)、乳酸脫氫酶(LDH)和肌酸激酶(CK)活性出現(xiàn)明顯波動(dòng)變化，益生素和葡聚糖處理有明顯回調(diào)作用。益生菌和葡聚糖處理后超氧化物歧化酶(SOD)活性增加，谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)活性下降，說明益生菌能增加雛雞抗氧化和保護(hù)肝臟的能力。
　　 (2)益生菌和葡聚糖處理明顯影響冷應(yīng)激狀態(tài)下貴妃雛雞白細(xì)胞分類、免疫器官中肥大細(xì)胞數(shù)目和IL-2mRNA表達(dá)等免疫功能指標(biāo)。白細(xì)胞分類結(jié)果顯示，在急性冷應(yīng)激期間，雛雞的白細(xì)

4、胞分類計(jì)數(shù)波動(dòng)變化明顯，嗜堿性粒細(xì)胞數(shù)目和嗜中性粒細(xì)胞/淋巴細(xì)胞(H/L)比值都明顯增加。冷適應(yīng)后淋巴細(xì)胞數(shù)目明顯增加，嗜中性粒細(xì)胞明顯減少，H/L比值下降。益生菌明顯增加白細(xì)胞數(shù)量，葡聚糖降低了嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)目。
　　 免疫器官肥大細(xì)胞組織學(xué)染色計(jì)數(shù)結(jié)果顯示，急性冷應(yīng)激后哈氏腺內(nèi)肥大細(xì)胞增多，益生菌和葡聚糖處理可雙相調(diào)節(jié)肥大細(xì)胞數(shù)量；冷應(yīng)激后胸腺內(nèi)肥大細(xì)胞數(shù)目減少，益生菌處理可回調(diào)其數(shù)目；益生菌和葡聚糖處理可上調(diào)法氏囊和脾臟肥

5、大細(xì)胞數(shù)量。RT-PCR結(jié)果顯示脾內(nèi)IL-2mRNA表達(dá)水平在應(yīng)激24h內(nèi)先降后升，益生菌短期處理對(duì)其影響不明顯；而葡聚精處理15d后，其表達(dá)水平明顯升高，表明葡聚糖對(duì)雛雞脾臟有免疫調(diào)節(jié)功能。胸腺內(nèi)IL-2mRNA表達(dá)水平在應(yīng)激12-24h后明顯升高，在慢性應(yīng)激到冷適應(yīng)階段表達(dá)水平明顯下降。益生菌和葡聚糖處理有上調(diào)作用。法氏囊內(nèi)IL-2mRNA表達(dá)變化與胸腺內(nèi)情況類似。這些結(jié)果提示冷應(yīng)激對(duì)雛雞細(xì)胞免疫功能有明顯影響，而益生菌、葡聚糖能提

6、高雛雞適應(yīng)冷應(yīng)激的能力，改善應(yīng)激狀態(tài)下的細(xì)胞免疫功能。
　　 (3)益生菌和葡聚糖處理明顯影響冷應(yīng)激狀態(tài)下貴妃雛雞脾臟、胸腺及法氏囊組織中HSP70mRNA表達(dá)。RT-PCR結(jié)果顯示雛雞受到冷應(yīng)激4h后，法氏囊內(nèi)HSP70mRNA表達(dá)水平大幅升高，而胸腺內(nèi)其表達(dá)水平在冷應(yīng)激4h內(nèi)明顯下降，應(yīng)激3d后有大幅上升。而脾內(nèi)HSP70mRNA表達(dá)變化不明顯。說明冷應(yīng)激對(duì)不同器官內(nèi)HSP70mRNA表達(dá)影響不一樣。益生菌處理明顯降低雛雞脾