瘤胃兼性厭氧CDB的分離鑒定及其對奶牛生產(chǎn)性能的研究.pdf

1、瘤胃含有大量微生物，是粗纖維的天然發(fā)酵罐，反芻動(dòng)物80％的粗飼料在此被分解利用。我國作為一個(gè)農(nóng)業(yè)大國，每年有大量的作物秸稈由于利用不當(dāng)被浪費(fèi)。為提高其利用率，瘤胃細(xì)菌成為目前的研究熱題。由于瘤胃內(nèi)主要纖維降解菌對環(huán)境要求較高，所以瘤胃兼性厭氧菌逐漸成為研究熱點(diǎn)。本研究將從瘤胃中分離鑒定一株兼性厭氧纖維素分解菌，研究其對瘤胃發(fā)酵及泌乳中期奶牛產(chǎn)奶量和乳成分的影響。試驗(yàn)分為以下四個(gè)方面：
　　 試驗(yàn)一，試驗(yàn)通過選擇性培養(yǎng)基初篩，分離

2、得到19株有纖維降解作用的菌株。經(jīng)過纖維素剛果紅培養(yǎng)基鑒別和固體發(fā)酵培養(yǎng)復(fù)篩，測定纖維素酶活及干物質(zhì)降解率，以R3的降解效果最佳，其透明斑直徑/菌落直徑為6.27、羧甲基纖維素酶活(CMCase)為5.94 U/g，濾紙?zhí)敲富?FPase)為1.12 U/g、DMD達(dá)到23.73%。
　　 試驗(yàn)二、試驗(yàn)通過對R2、R3、R4、R5及R19菌株的形態(tài)學(xué)、生化鑒定、菌株生長特性及安全性研究。結(jié)果顯示R2為棒狀桿菌屬、R3為纖維單胞菌

3、屬、R5芽孢桿菌屬，另外2株經(jīng)鑒定沒有完全符合的編號(hào)。被測菌株的耐受pH值為5.0～10.0，對溫度的耐受性則不高，47℃生長較差，除R4外，其它菌株安全性較高。
　　 試驗(yàn)三、試驗(yàn)采用單因素有重復(fù)的試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選用4頭裝有永久性瘤胃瘺管，體況相近的荷斯坦奶牛，取其瘤胃液混勻，添加不同劑量的R3培養(yǎng)物進(jìn)行體外發(fā)酵培養(yǎng)，分別為：對照組(0 cuf/g)，第一組(3%添加量，4.4×108 cuf/g)，第二組(5%添加量，7.8×1

4、08 cuf/g)，第三組(10%添加量，1.2×109 cuf/g)，設(shè)2、4、8、12、24、36、48七個(gè)時(shí)間點(diǎn)，各時(shí)間點(diǎn)3個(gè)重復(fù)。結(jié)果表明：R3細(xì)菌培養(yǎng)物可極顯著提高底物的DMD、NDFD及ADFD，較對照組分別提高35.41%、48.90%、30.23%，顯著提高BCP、TVFA和乙酸的濃度、CMCase、FPase及瘤胃微生物對氨的利用率，且以第一組的效果最為顯著。但對丙酸、丁酸濃度及乙酸/丙酸的比值沒有顯著影響：據(jù)細(xì)菌培養(yǎng)

5、物添加種類的不同分：DZ(底物)，R3(底物+R3培養(yǎng)物)，KC(底物+枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物)，DY(底物+地衣芽孢桿菌培養(yǎng)物)，培養(yǎng)24 h，每組3個(gè)重復(fù)，細(xì)菌數(shù)均為4.4×108 cuf/g。結(jié)果表明：R3、KC、DY組均極顯著的提高了BCP的含量及發(fā)酵底物的DMD、ADFD及NDFD，且均可提高瘤胃微生物對氨的利用率，但對TVFA、乙酸、丙酸、丁酸含量及乙酸/丙酸均無顯著影響，但各脂肪酸的含量均有升高趨勢。
　　 試驗(yàn)四、本

6、文旨在研究不同劑量的R3培養(yǎng)物對泌乳中期中國荷斯坦奶牛奶產(chǎn)量及乳成分的影響。試驗(yàn)選用15頭體重、胎次、產(chǎn)奶量均相近的中國荷斯坦奶牛，采用完全隨機(jī)的試驗(yàn)設(shè)計(jì)，分為3個(gè)處理組，即對照組(0 cuf/d)、第一組(0.75×1011 cuf/d)、第二組(1.5×1011cuf/d)，試驗(yàn)期75天(預(yù)試期15 d，正試期60 d)。研究結(jié)果表明：兩試驗(yàn)組與對照組相比產(chǎn)奶量分別提高1.96%、7.31%。第二組與對照組相比4%標(biāo)準(zhǔn)乳及能量校正乳

7、分別提高12.05%、12.77%，差異極顯著(P<0.01)：第二組的F%、F、P%及SNF較對照組分別提高14.92%、6.61%、8.97%、6.77%，差異顯著(P<0.05)，P含量提高17.73%，差異極顯著(P<0.01)。兩試驗(yàn)組牛奶中L、L%及SNF%較對照組無顯著差異(P>0.05)。
　　 綜上所述，奶牛瘤胃中存在一定數(shù)量的兼性厭氧纖維分解細(xì)菌。由研究結(jié)果顯示，本試驗(yàn)從瘤胃液中篩選獲得的R3(纖維單胞菌屬)